南通整合位点方法

基因zhiliao产品特有的可能会引起迟发性不良反应的风险因素包括：基因组整合活性。基因zhiliao产品可能会采用修饰宿主基因组的技术，并有可能在宿主细胞或组织中持续存在。很多基因zhiliao载体的基因整合不会指向基因组的特定位点，可能在整合位点处产生插入突变、或jihuo整合位点附近的原基因等，进而破坏重要基因功能或增加恶性liu的风险，例如，国外已有多项研究报告在接受了使用γ-逆转录病毒载体转导的基因修饰细胞zhiliao的受试者中发生白血病。因此，对于存在此类风险的产品，有必要进行长期随访临床研究以评估出现迟发不良反应的风险。整合位点实验室，推荐唯可生物，实验实力强，专业性高，检测效率高，结果准确率高。南通整合位点方法

2020年9月发布的《细胞zhiliao产品申请临床试验药学研究和申报资料的考虑要点》“生产工艺开发的技术要求”及“质量研究和质量控制中的安全性研究”部分要求提供目的基因在染色体中的整合情况及提供细胞恶性转化（成瘤性和致瘤性）进行安全性研究和评估内容。2020年2月发布的《免疫细胞zhiliao产品临床试验技术指导原则（试行）》中规定：探索性临床试验的安全性和耐受性要考虑"外源基因随机整合到细胞基因组形成插入突变，导致成瘤性和恶性转化等"。南通整合位点方法整合位点安评，推荐唯可生物，实验实力强，专业性高，检测效率高，结果准确率高。

应用场景：单克隆抗体药物辅助筛选；致xingbing毒整合位点检测与整合偏好性分析等；WGS不适用于转染之后未经过传代培养和表型筛选的细胞系。丰富的项目经验目前，唯可已与国内外多家免疫zhiliao研究前沿企业开展合作，采用该方法对高度异质性的CAR-T细胞进行整合位点检测与细胞安全性评估，具有较为丰富的项目经验。一般HBV插入到基因组中形成下图结构。使用三代测序，靶向插入区域的测序reads可分为Readsgroup1（HBV插入区域测通）和Readsgroup2（reads部分比对染色体，部分比对HBV插入区域）。基于三代数据比对后bam文件的IGV图，判断变异类型，推断断点类型和插入序列。

单克隆扩增=变？相反的，可能是疗效持久的正面信号。那么在临床过程中发现迟发性单克隆慢病毒整合增殖就一定高度怀疑二次成瘤吗？其实CAR-Tzhiliao到目前为止还没有导致T细胞恶性liu的报告。一项调查年到2017年CAR-CD19临床I/II期ALL、NHL、CLL病人的回顾数据显示，研究队列中NHL患者有11%的继发性恶性liu发生率，与NHL常规zhiliao后继发性恶性liu的预期发生率相似(4–10%)。单克隆高度扩增可能维持药物持久性而非变，一项CAR-CD19在CLL中的临床试验发现，尽管CAR-CD19对CLL的临床效果不甚理想，但有一例病人的zhiliao效果非常好。AAV整合位点，推荐唯可生物，实验实力强，专业性高，检测效率高，结果准确率高。

申请人可以基于总体临床研究规划考虑早期探索性研究的设计，在早期研究中纳入有助于未来产品研发的设计要素，例如，在I期临床试验中设置有效性或体内药效学观察指标，以收集有效性的初步证据。申请人有时会考虑将早期研究设计为I期和II期合并进行的I/II期试验，在剂量递增和推荐剂量明确后，进入扩展期，以推荐的剂量水平继续入组额外的患者，进一步观察免疫细胞zhiliao产品的疗效。如果采用该类设计，在试验方案中应明确从剂量递增阶段转到扩展阶段的原则和方法。从细胞游离DNA中检测载体整合位点。病毒整合位点实验室

通过分选CAR-T 细胞,对T细胞受体(TCR)β链库进行深度测序(TCR-seq)以及慢病毒载体整合位点(LVIS)分析。南通整合位点方法

当产品预期的活性成分可以明确时，申请人往往选择较能代预期活性的特定细胞亚群来描述产品剂量，例如，很多导入外源基因的免疫细胞zhiliao产品中的载体阳性细胞数。在这种情况下，申请人还应描述载体阳性细胞数与其它细胞成分的比例，并分析转导效率对患者安全性及有效性的影响。剂量递增，在恶性liu患者中开展早期探索性临床试验时，申请人经常选择3+3、改良毒性概率区间（mTPI）和贝叶斯比较好区间（BOIN）等设计。对于shou次开展人体临床研究的免疫细胞zhiliao产品，在选择剂量探索试验每个剂量组的样本量以及组间剂量增幅时，还应考虑非临床研究及类似产品的临床经验中剂量变化对受试者安全性和有效性的影响。南通整合位点方法