胎牛血清和新生牛血清的区别是什么?取血年龄不同:牛血清按照牛取血时间或牛龄可进行区分。胎牛血清(FoetalBovineSerum,简称FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹得来的胎牛。国产胎牛血清(并无明确定义,但通常以此称)的指的是出生4-6小时,且未进行哺乳(unsuckled)进食的牛,有时还称作国产新生牛。新生牛血清(NewbornCalfSerum,简称NBCS)指的是出生14天-3个月进行取血的牛。成年牛血清(AdultBovineSerum,简称ABS)指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛。以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专门为取血而养的牛。组分与比例不同:这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。胎牛血清培养效果好于新生牛,且因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低。用途与用法不同:根据细胞所需生长条件可确定。我们通过多次传代,分辨同细胞、同代次、不同血清样品培养的细胞形态间的细微差异。深圳动物血清培养基
血清使用常见问题1、血清保存的比较好方法?我们建议血清比较好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶,建议无菌分装于适当的灭菌容器内冷冻备用。2、如何解冻血清,才能保证其质量不会受损?我们建议将血清从冷冻箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解冻,然后在室温下全融,解冻过程中必须规则地摇晃均匀。3、为什么血清在解冻后会出现絮状沉淀?应该怎样处理?血清中絮状沉淀产生的原因有很多,其中比较普遍的还是由于血清中脂蛋白的变性所致,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,这也是造成沉淀的主要原因,但这些絮状沉淀并不影响血清本身的质量。欲去除沉淀,可采取自然沉降法或者将血清分装于无菌离心管中,2000~3000rpm离心5min。一般不建议用过滤的方法去除絮状沉淀,因为沉淀会阻塞滤膜,造成过滤困难或无法过滤。浙江羊血清培养基供应蛋白酶克制剂,维护细胞免受死细胞开释的蛋白酶的损害。
用于使用敏感四环素诱导表达系统的细胞培养(Tet-on,Tet-off),以及其它对四环素敏感的实验中。6IR(辐照)钴60伽马辐照剂量在3.5Mrad.通过直接与间接作用将生物大分子(如核酸)键结破坏,人畜用药物/疫苗,及对微生物负荷(Bioburden)要求比较高水平的实验。7HI(热灭活)处理血清56℃,30Min,破坏补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解。8胚胎干细胞(ES)特用血清是从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。9间充质干细胞(MSC)特用血清从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,通过传代及分化比例测试。
热灭活丨血清的意义?加热可以灭活补体系统。启动的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。在免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活丨血清。有必要对血清都进行热灭活吗?实验显示,热灭活丨血清对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至可能因为高温处理影响了血清的质量,造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物会明显地增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热灭活处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保血清的质量。血清长时间储存在2-8℃时。
关于热灭活胎牛血清不推荐热灭活。热灭活一般是指在做免疫相关的试验中,通过加热灭活掉血清中的补体,以避免对免疫试验的影响。在胎牛血清中,由于胎龄原因,尚未形成完整的补体系统,因此,胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。并且,热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减,进而影响细胞培养效果。若针对某些特殊试验,对于胎牛血清一定要做热灭活,国际上推荐热灭活的方法:40℃水浴,20min。有下列情况者,对血清内应格外留意筛选:1.干细胞:干细胞对内非常敏感,如果血清中内≥3EU/ml时,干细胞很容易死亡。选择质量血清非常重要2.免疫细胞时:,过高的内可诱导免疫细胞释放炎症因子,抑制小鼠红细胞集落的形成等。3.基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果“失之毫厘,谬以千里”。血清的筛选验证主要包括:形态验证、增殖能力测试和克隆形成能力测试。苏州新生牛血清生产厂
合格的血清产品,需要严格控制采集血时间点,才能保证比较基本的血清质量--山东云海生物。深圳动物血清培养基
为何血清会存在批间差?如何避免此影响?因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。为了避免批间差异对细胞的影响,XP建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何预防和处理沉淀?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘连蛋白,磷酸钙[1](显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。预防措施与建议:因此不立即使用的血清应保存在-20℃或以下。深圳动物血清培养基
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