为何血清会存在批间差?如何避免此影响?因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。为了避免批间差异对细胞的影响,XP建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何预防和处理沉淀?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘连蛋白,磷酸钙[1](显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。预防措施与建议:因此不立即使用的血清应保存在-20℃或以下。碳水化合物,脂肪,生长因子,矿物质及微量元素。常州鸡血清采购平台
1989年左右,也有国外学者建议用猪血清取代牛血清,用于培养制造非洲猪瘟病毒的细胞(见《动物检疫》1991年01期《猪血清中的牛血清白蛋白抗体引起非洲猪瘟血清学诊断的假阳性反应》),原因是牛血清中的白蛋白会干扰非洲猪瘟抗体的检测,造成假阳性反应。其他动物源血清兔血清:兔血清通常从六个月或更小的动物身上收集,可用于与BSA结合用作免疫细胞化学[1]和免疫组织化学中的封闭血清。山羊血清:多用做封闭液,也有一些研究人员发现,质量的山羊血清可用于某些细胞的培养。鸡血清:从屠宰供人类食用的健康鸡中收集的。有研究用于血清维生素B12的放射性同位素稀释测定 常州牛血清厂家直销血清分离质量的好坏,直接影响到监测结果,所以掌握畜禽的采集血分离血清的方法尤为重要。
胚胎干细胞(ES)特用血清是从多个批次的胎牛血清经过细胞培养及其他测试筛选出特定批号,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。间充质干细胞(MSC)特用血清从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,通过传代及分化比例测试。牛血清的介绍和概述牛血清是动物血清中的一种,是细胞培养中重要的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成分,也是一种常用的生物化学试剂,有着广泛的应用。由于牛本身是大型动物,在研究上具有操作便捷性,收获效率高等优点,故牛血清行业应用非常普遍。
鸡血清成分的分析将鸡血通过离心技术分为血浆和血细胞,得到的血浆再进行冷冻处理后,利用快速融解法除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原即是血清。血浆约占血液总量的55%,其中含8%的血浆蛋白,通过盐析法可将其分为3类:白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原,其中纤维蛋白原所占比例比较好小,所以比较好终得到的血清为60%~80%。血清中有90%~91%的水,6.5%~8.5%的蛋白质,2%左右的低分子量蛋白质,近年来对血清中的低分子量蛋白质研究较多,但在利用血清之前需要进行过滤提纯,除去血清中的血清蛋白和免疫球蛋白,然后对提纯的低分子量蛋白进行试验。BjorhallK等人[2]对目前多种去除血清中大蛋白的方法进行了分析研究,发现除蛋白的试剂盒更适用于试验使用,该试剂盒操作简易、方便,因只供一次性使用,所以很大降低了样品的交叉污染,其中多维亲和层析柱还可同时除去多种大蛋白。因此,血清样品利用之前要与多种技术相结合进行预处理,之后再进行相关研究。动物血清供应细胞生计和增殖所必需的生长调理因子。
这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。胎牛血清培养效果好于新生牛,且因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低。故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行细胞培养。胎牛血清根据实验要求的不同又进行了特殊加工工艺加工,那么在这么多种类的血清面前,要怎么选择适合自己细胞培养的那一款呢?我们需要知道都有哪些种类的牛血清和它们的用途:1透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白均被移除。透析血清主要用在进行营养成分优化和标定特定成分进行研究的实验中。2碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的亲脂类(lipophilic)物质,如某些、细胞因子、生长因子等,去除作用对分子量大小并无区分。碳吸附胎牛血清常用于体外培养研究验证的作用效果。3去外泌体血清适用于收集细胞分泌的外泌体时使用。4低IgG血清用于研究抗体、病毒和病毒反应、细胞表面抗原表位。在对细胞和活疫苗进行支原体检验中,《兽药典》也明确推荐了猪血清作为支原体检验用液体培养基的组成成分。四川牛血清生产商
血清中供给了适量且份额适中的各式各样的激从来确保动物细胞离体后的正常代谢。常州鸡血清采购平台
拿到血清,较早接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要。颜色根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采集血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。国产血清的采集血点很分散,大多是由屠户采集血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量比较好的呈现出谈黄、微红色。当然,热灭清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。常州鸡血清采购平台
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