⚑血清应如何保存?未拆封的血清应存放于-15至-20℃,避免反复冻融。拆封后的血清应无菌分装成一次的用量并存放于-15至-20℃,2~8℃溶解后建议尽快使用。⚑血清的有效期是多久?大部分血清效期是5年,针对每个批次,请通过质检文件确定具体效期日期。⚑血清应如何融解?取出的血清置于2~8℃融化,不时旋转混匀,充分融解后分装或使用。⚑为什么有时血清中出现絮状沉淀?是否需要去除?如何去除?多种原因可能导致絮状沉淀的形成,比较常见的原因之一是融化过程中,脂蛋白聚集所致。该现象一般不会影响产品质量。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般比较常用的是0.22umPES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂,一般表现出微红色或橘红色。山东动物血清
不同类型血清比较的报道:2020年8月《生物学杂志》第4期刊登了一篇《不同类型牛血清对MDCK细胞培养效果研究》,研究了进口胎牛血清、国产胎牛血清、国产新生牛血清对MDCK细胞的促生长效果。作者在含10%不同类型牛血清的DMEM培养液中连续传代培养MDCK细胞,比较了三种血清培养MDCK细胞的传代稳定性、比较大増殖密度、倍增时间、比生长速率、贴壁率等指标。结果显示,在比较大增殖密度和倍增时间上,胎牛血清均优于新生牛血清。在贴壁率方面[贴壁率(%)=(所形成集落数/接种细胞数)×100%],进口胎牛血清略高于国产胎牛血清,差异明显;国产新生牛血清低于国产胎牛血清和进口胎牛血清,差异极明显。山东鸡血清培养基在一些情况下,中和毒性物质维护细胞不受损害。
主要作用提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。●提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质(氢化可的松、)、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢中起重要作用,如SeO3,硒等
血清的分类根据取血年龄的不同,血清有以下分类:取血牛龄主要受当地畜牧业发展情况及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专为取血而养的牛。01胎牛血清(FetalBovineSerum,简称FBS)取自尚未出生,母牛剖腹心脏穿刺取血得到的血清。02国产胎牛血清(并无准确定义,但通常以此命名)出生4-6小时,未进行哺乳进食的新生牛,也有称作国产新生牛血清。03新生牛血清(NewbornCalfSeurm,简称NBCS)也有称作小牛血清,指的是出生14天-90天的进行取血的牛血清(也有说是指出生10天-90天)。04成年牛血清(AdultBovineSerum,简称ABS)指取血时牛龄超过6个月的牛血清。碳水化合物,脂肪,生长因子,矿物质及微量元素。
马血清10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答, 常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基。猪血清猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养, 疫苗生产(生产支原体), 中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV), 用于诱导大鼠肝纤维化, 作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。兔血清正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。羊血清用于生物医学研究的大多数细胞系和原代培养物上,FBS的合适替代物,病毒分离和鉴定,病毒学研究。用作鱼类细胞培养的有效NBCS替代物。可成功地代替胎牛血清在生长培养基中长期用于环孢蘑菇的体外繁殖。有些时候,根据实验需求,还要对血清进行一些特殊的加工。济南羊血清订购
可以使血清分离快,分离血清多不易受外界温度的影响。山东动物血清
常规细胞培养需要添加血清来维持细胞的增殖能力,尽管血清可以满足一般细胞培养需求,但在进行营养成分优化和标记特定成分进行研究的实验中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。透析是将血清循环通过中空纤维,并在血清中补充生理盐水以维持渗透压,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白等。因此透析胎牛血清主要用于关注小分子浓度的特殊研究,包括:研究蛋白质组学、同位素标记、细胞信号传导和报告基因分析、报告基因细胞系的筛选等。山东动物血清
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