何谓热灭活一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和焕活。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是"小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。血清的保质期是5年,储存温度-10 ~ -30℃。聊城猪血清
佐剂由于不同个体对同一抗原的反应性不同,而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱,因此常常在注射抗原的同时,加入能增强抗原的抗原性物质,以刺激机体产生较强的免疫反应,这种物质称为免疫佐剂。佐剂除了延长抗原在体内的存留时间,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激网状内皮系统,使参与免疫反应的免疫活性细胞增多,促进T细胞与B细胞的相互作用,从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。常用的佐剂是福氏佐剂(Freundadjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份羊毛脂与石腊油的比例,视需要可调整为1:2~9(V/V),这是不完全福氏佐剂,在每毫升不完全佐剂加入1~20mg卡介苗就成为完全佐剂。烟台猪血清品牌血清在细胞培养中为细胞提供氨基酸,蛋白质,维生素(特别是脂溶性维生素如A,D,E,K)。
常规细胞培养需要添加血清来维持细胞的增殖能力,尽管血清可以满足一般细胞培养需求,但在进行营养成分优化和标记特定成分进行研究的实验中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。透析是将血清循环通过中空纤维,并在血清中补充生理盐水以维持渗透压,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白等。因此透析胎牛血清主要用于关注小分子浓度的特殊研究,包括:研究蛋白质组学、同位素标记、细胞信号传导和报告基因分析、报告基因细胞系的筛选等。
HI(热灭活)处理血清血清热灭活是通过提高血清温度到56℃,并保持该温度30Min完成,可以去除血清内补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解。加热可以灭活补体系统。焕活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,焕活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究中培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活于血清。胚胎干细胞(ES)特用血清是从多个批次的胎牛血清经过细胞培养及其他测试筛选出特定批号,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。间充质干细胞(MSC)特用血清从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,通过传代及分化比例测试。在动物细胞培养中,常用的血清有胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清、马血清。
猪血清(货号:C2500-0100/0500/1000)猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养,疫苗生产(生产支原体)中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV),用于诱导大鼠肝纤维化,作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。//兔血清(货号:C2520-0100/0500)正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。//羊血清(货号:C2530-0010/0100/0500)用于生物医学研究的大多数细胞系和原代培养物上,FBS的合适替代物,病毒分离和鉴定,病毒学研究。用作鱼类细胞培养的有效NBCS替代物。可成功地代替胎牛血清在生长培养基中长期用于环孢蘑菇的体外繁殖。//鸡血清(货号:C2550-0100/0500)适用于单抗研制、规模化培养的疫苗生产、生物医学研究和诊断试剂生产。//驴血清(货号:C2540-0010/0100/0500)适用于单抗研制、免疫组化、规模化培养的疫苗生产、生物医学研究和诊断试剂生产。畜禽采集血分离血清是疫病监测、检测、诊断和评估免疫效果的一项前提性工作。山东猪血清生产商
所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。聊城猪血清
2.取血方式不同胎牛血清:母牛怀孕3-8个月时,采用剖腹心脏密闭穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供体牛血清:分别是取自新生牛(小牛)、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分比较少;促细胞生长因子、促附因子、及其他活性物质等组分也不同于其他几类血清4.用途不同某些细胞的培养必须使用胎牛血清才行,如:干细胞、淋巴细胞、神经细胞、星状胶质细胞等;而有些细胞需要小牛血清就可以,如:肿瘤细胞等。使用浓度也不同,一般在10%-15%,有特殊要求的浓度在20%聊城猪血清
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