上海sirna转染试剂选购

原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖。因此，它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系，它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后，原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命（即它们是有限细胞系），且随着传代的进行，具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位，从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说，这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便，尤其是稳定转染的克隆传代...并更换培养基，继续培养24 h后收取细胞，用PBS洗涤3次以上，以备RNA抽提。上海sirna转染试剂选购

在难转染细胞（原代大鼠动脉平滑肌细胞）转染效率的比较图片由芝加哥大学肺和重症护理系的NickolaiDulin博士友情提供制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用LipoD293™试剂（左图）和Lipofecatmine2000（L2K,右图）分别将GFP的cDNA（pEGFP-N3）按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染24小时后，用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光，以此来评价转染效率。对难转染细胞LNCap细胞转染效率的比较在难转染细胞（原代大鼠动脉平滑肌细胞）转染效率的比较图片由罗斯威尔公园**研究所（RoswellCancerInstitute）原代细胞转染试剂盒MagTransf 磁转染试剂实现高效转染解析.

X-tremeGENE9DNA转染试剂简介：X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂，溶于80%乙醇中，经0.2μm滤膜过滤，然后封装于玻璃小瓶中，适用于细胞分析的多种实验。优势：1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高，生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间，只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释，再与质粒DNA共同孵育，即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化工作.

对HepG2细胞转染效率的比较右图：使用以上转染试剂将GFP的cDNA（pEGFP-N3）按照生产商的提供的转染步骤转染到HepG2细胞（在胶原预处理的培养皿中培养）。在转染48小时之后，用流式细胞仪检测GFP阳性细胞（%）和荧光强度。左图：血清和***存在的条件下能提高LipoD293试剂（升级版）对在HepG2细胞的转染效率。通过三种不同的条件下转染HepG2细胞（生长在胶原处理的培养皿上）---无血清和***，10%血清和***的存在，转染5小时后换液和不换液。每孔培养体积均为100μL，细胞数目在105左右。

美国Polysciences公司是一家成立于1961年，致力于特殊技精细化学试剂、实验室产品，单/多聚体等产品的研发供应，所提供的产品服务于组织学（显微技术）、生物技术、电子技术、护理及制药工程等多个领域。起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案，帮助科学家揭示未知领域。随后，开拓了在病理（组织研究）应用产品，使组织除了石蜡包埋外，还能够包埋在塑料块中；开发染料和染色剂，以实现更好的样品观测方式。与****合作，开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家**中心合作，开发天然产物分离和纯化产品，并用于紫杉醇的初步临床试验。继而开发出超顺磁珠，用于DNA、蛋白质和肽的研究。随后分离血清并检测FVII蛋白的水平（Biophen 显色检测）。原代细胞转染试剂盒

我们希望把mRNA转染进入原代细胞，那**适合的转染产品就是Lipofectamine MessengerMAX™或是Neon电转仪。上海sirna转染试剂选购

基于磷酸钙成分的转染试剂，其主要作用原理是与DNA通过沉淀反应形成磷酸钙-DNA复合物，粘附到细胞膜表面，借助内吞作用进入细胞质。pH值，钙离子浓度，DNA浓度，沉淀时间，细胞孵育时间乃至各组分加入顺序都可能对结果产生影响，因此实验条件摸索和优化时间较长，且重复性不佳。基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。此方法操作简单，重复性好，在体外转染中有很高的效率，但具有一定的细胞毒性，可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响，需要去除血清。上海sirna转染试剂选购

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