唐山无血清细胞冻存液厂家供应

产品简介我们经过长期的实验研究与反复验证，研发出一系列新型细胞冻存产品，能有效地提高常规细胞、原代细胞与干细胞的复苏后存活率与活力。产品质量稳定可靠，使用方便，助力科研工作者摆脱程序繁琐、操作复杂、容易污染的传统冻存方法，专注于后续实验研究。LiveCyteTM（LC-1601）是即用型细胞冻存液，所含化学成分明确，无动物源性成分，可一步实现细胞冻存并长期在-80℃冰箱保存，保护细胞免受冰晶和溶质损伤，适用于大多数常规细胞。LiveCyteTM（LC-1602）是原代细胞及干细胞**冻存液，可进一步提高原代细胞和干细胞冻存效率。含血清，细胞污染(细菌、霉菌和支原体等)的风险更高。唐山无血清细胞冻存液厂家供应

无血清细胞冻存液冻存细胞实验步骤：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。3.取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去离心管中的上清液。4.加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。5.将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6.直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。7.若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。昆明无血清细胞冻存液供应商无血清冻存液用途：无血清细胞冻存液用于免疫细胞及干细胞的存储。

冻存温度：冻存温度是指能长期保存细胞的较低温度，在此温度下，细胞生化反应极其缓慢甚至停止，但经过长期保存，在复苏后仍能保持正常的结构和功能。不同的细胞和生物体以及使用不同的冷冻保存方法要取得同样的冷冻保存效果，冷冻保存温度可以不同。但从实际和效益的观点出发，液氮温度-196℃是目前较佳的冷冻保存温度。在-196℃时，细胞的生命活动几乎完全停止，但复苏后细胞的结构和功能完好。如果冷冻过程得当，一般生物样品在-196℃下均可保存十年以上。应用-70℃～-80℃保存细胞，短期内对细胞的活性无明显影响，但随着冻存时间延长，细胞存活率明显降低。在冰点到-40℃范围内保存细胞的效果不佳。

无血清细胞冻存液与含血清细胞冻存液对比：传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，统称为含血清细胞冻存液。含血清细胞冻存液的一般的冻存方法是梯度降温冻存法，如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟，然后移至-20℃冰箱30分钟，再移至-80℃冰箱保存16-18个小时（或隔夜），较后才移至液氮罐中进行长期的储存。可见，含血清细胞冻存液冻存细胞时遇到的问题：1.冻存细胞时需现配冻存液(如购买市面上通用的含血清细胞冻存液，此步可省略)。2.需要程序降温（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步骤繁琐，耗时耗力。3.含血清，细胞污染(病毒、霉菌和支原体等)的风险更高。4.血清批次、品质间差异导致冻存液的批次间差异。5.需液氮冻存，且不能原位（如孔板）冻存。无血清细胞冻存液：一些保护剂，易于穿透细胞，避免细胞内部水分子形成冰晶损伤细胞。

细胞冻存的操作步骤：1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；2.取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。3.去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；4.离心1000rpm，5min；5.去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的较终密度为5×106/ml～1×107/ml；6.将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5ml；7.在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；8.冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。反复吹吸混匀后，分装于细胞冻存管中，每管500ul-1000ul。重庆无血清细胞冻存液直销价

无血清细胞冻存液，为多种保护剂组合。唐山无血清细胞冻存液厂家供应

细胞冻存注意事项：1、细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml－15m培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。2、复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。3、加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1％。所以如果你的冻存液的浓度是10％DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。唐山无血清细胞冻存液厂家供应