南京正规无血清细胞冻存液厂家推荐

年连续三年成为新赛美全产品线中“受客户喜欢的科研产品”“无血清细胞冻存液关键技术及产业化”项目成功入围“2017年东吴科技创新创业人才计划“3优势分析传统冻存液CELLSAVING成分“血清+培养基+dmso”四大类，成分明确，不含血清安全性1、微生物污染风险2、批次不稳定1、无微生物污染风险险2、批次稳定操作1、4℃(40min)→20℃(30min)→80℃→液氮2、程序性降温盒（多人共用；异丙醇）直接冻于-80℃冰箱，长期保存效果活率偏低，批次有差异，不适用无血清细胞冻存90%以上，复苏后几乎看不到死细胞无血清细胞冻存液产品性能：不含动物来源性蛋白，能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染。南京正规无血清细胞冻存液厂家推荐

无血清细胞冻存液：采用patent的冻存配方，用包括重组人血白蛋白等多种蛋白组分替代了血清的用途。用包括DMSO在内的复合冻存保护剂替代了单一的DMSO的保护作用。复合保护剂的内部保护剂，易于穿透细胞膜，避免在细胞冻存过程中细胞内部的水分子形成冰晶损伤细胞；外部保护剂，可在溶液形成冰晶之前，在细胞膜外部竞争性的结合细胞膜表面的水分子，从而降低细胞外溶液的电解质浓度，减少阳离子进入细胞的数量。在细胞内部与外部的协同保护作用下，明显降低了温度迅速下降与温度上升对细胞的损害，因此大幅度提高了细胞经过冻存后的复苏存活率。温州正规无血清细胞冻存液进货价无血清细胞冻存液产品性能：通常细胞冻存液的配方是由胎牛血清加上DMSO组成。

细胞冻存配制含10%DMSO或甘油的细胞冻存液，4℃预冷（新鲜配制的冻存液会产生大量的热）；取对数生长期的细胞，用细胞消化酶将单层生长的细胞消化下来；悬浮细胞则直接将细胞收集到离心管中；离心1200rpm，6min；去除上清液，逐渐加入适量预冷的细胞冻存液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中的细胞终浓度为5×10e6/ml~1×10e7/ml；将细胞分装入冻存管中，每管1~1.5ml；在冻存管上标明细胞的名称、冻存时间及操作人员姓名；冻存：标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/min；到达-80℃时，则可迅速放入液氮中。

细胞冷冻的原理：细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以比较大限度的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%．15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO)，可使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。无血清冻存液用途：无血清细胞冻存液用于医院样本库细胞样本保存。

细胞冻存液的操作步骤：1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的冻存细胞培养液;2.取对数成长期的体细胞，除去旧细胞培养液，用PBS清理。3.除去PBS，添加适量蛋白酶(遮盖细胞培养皿表层)把单面生长发育的体细胞消化吸收出来;4.抽滤1000rpm，5min;5.除去蛋白酶，添加适量配置好的冻存细胞培养液，用塑料吸管轻轻地吹打使体细胞匀称，记数，调整冻存液中体细胞的较后相对密度为5牙周106/ml～1牙周107/ml;6.将体细胞分装进冻存管中，每管1～1.5ml;7.在冻存管上标出体细胞的名字，冻存时间及作业者;8.冻存：标准的冻存程序流程为减温速度-1～-2℃/min;当温度达-25℃下列时，可升至-5℃～-10℃/min;到-100℃时，则可快速渗入液态氮中。也可将配有体细胞的冻存管放进-20℃电冰箱2h，随后放进-70℃电冰箱中留宿，取下冻存管，移进液氮容器内。无血清细胞冻存液用于其他类型哺乳动物细胞的储存。上海无血清细胞冻存液报价

开盖之前，用70%的乙醇或异丙醇擦拭瓶身。南京正规无血清细胞冻存液厂家推荐

无血清快速细胞冻存液保存条件：储存于4℃以下。质量保障期从产品的生产日期起，为期2年。3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能-20℃冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低，推荐将产品分装成小管后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。无血清快速细胞冻存液细胞冷冻保存方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1、按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2、按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。3、取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去离心管中的上清液。4、加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。5、将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6、直接将含细胞混合液的冻存管放入-70℃以下冰箱，长期冷冻保存。7、若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-70℃以下冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。南京正规无血清细胞冻存液厂家推荐