提取RNA的详细步骤:首先,将研钵晾干够,倒入1/3体积的液氮,加入0.2g均质的植物材料,充分研磨后转入一个含有300微升GMT的1.5ml的离心管中,摇匀。然后,加入30微升2mol/lNaAc进行摇匀,加入300微升酸酚摇匀,加入100微升的氯仿摇匀。然后,在四摄氏度12000r/min下离心二十分钟,吸取上清液的3/4,加入等体积的异丙醇,于冰上放置十五分钟。然后,在四摄氏度12000r/min下离心十分钟,将沉淀悬浮于含100微升的4mol/lLiCl小试管中,于-20摄氏度下放置过夜。然后,在4摄氏度13000r/min下离心10-15min,将沉淀溶于0.4mlDEPC处理水中,加入1/2体积氯仿和1/2体积酸酚,摇匀,进行抽提,在4摄氏度13000r/min下离心五分钟。将上清液中加入等体积的氯仿摇匀,进行抽提,在四摄氏度13000r/min下离心五分钟,上清液中加入1/10体积3mol/lNaAc和两倍体积的午睡乙醇与-20摄氏度放置一小时。快速程序在25-40分钟内提供高质量的总RNA。唐山RNA提取试剂厂家现货

拭子RNA提取试剂的选择?拭子样本的量与提取的核酸量成正比,如果要提高核酸得率,也可通过增加样本量来实现。一般先取一根拭子的涮洗液样本,然后进行提取,如结果不理想可考虑增加样本量或重新采样。但如果增加样本量或重新采样还不能得到满意结果,应及时考虑更换试剂盒。目前国内常用的拭子核酸提取试剂有Q、Biog等。根据我们的经验,Q和T品牌试剂盒的拭子RNA提取得率(一根口腔拭子在口咽部来回刮擦10次)在0.5-3.5ug。同样处理的口咽拭子,Biog试剂盒的提取得率在1-4ug,基本上都能满足下游PCR相关实验的要求。唐山正规RNA提取试剂推荐厂家提取的RNA样品中不应存在对酶存在压制作用的有机溶剂及过高浓度的金属离子。

将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脱液,室温放置1~2分钟。12000rmp室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。昆虫RNA柱式提取试剂盒使用方法:将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rmp室温离心半分钟,弃穿透液。将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rmp室温离心半分钟,弃穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室温12000rmp离心半分钟,弃穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室温12000rmp离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。室温12000rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
DNA称脱氧核糖核酸,是一种分子,双链结构,由脱氧核糖核苷酸(成分为:脱氧核糖、磷酸及四种含氮碱基)组成。可组成遗传指令,引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为“蓝图”或“食谱”。RNA称核糖核酸,是以DNA的一条链为模板,以碱基互补配对原则,转录而形成的一条单链,主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达,是遗传信息传递过程中的桥梁。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤,G鸟嘌呤,C胞嘧啶,U尿嘧啶。其中,U尿嘧啶取代了DNA中的T胸腺嘧啶而成为RNA的特征碱基。RNA是核糖核酸,DNA是脱氧核酸。区别:1.两性解离:DNA无,bai只有酸解离,碱基被屏蔽(在分子内部形成了H键)。RNA有,有PI。2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子长度/直径决定,DNA为线状分子,RNA为线团。3.碱的作用:DNA耐碱RNA易被碱水解。4.显色反应:鉴别DNA和RNA+浓HClRNA------→绿色化合物DNA------→蓝紫色化合物苔黑酚。二苯胺啡啶溴红(荧光染料)和溴嘧啶都可对DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的离心和电泳显色可用它们。植物RNA提取试剂产品特点:无需氯化铯梯度离心,无需氯化锂或乙醇沉淀。

通用多糖多酚植物RNA提取试剂盒:1、多糖多酚植物RNA提取试剂盒整合了在提取过程中去除干扰物的技术,已成功用于葡萄,中草药等多糖含量高的样品,成功用于棉花等多酚含量高的样品。另外华越洋还开发了糖类清理剂,PCR压制物清理剂,核酸提取优化剂,样品核酸稳定剂,RNA组织样品保存液等核酸提取辅助产品。2、适用材料普遍:尤其适合解决多醣多酚,色素等次级代谢物丰富的植物样本难题。昆虫RNA柱式提取试剂盒特点:操作简单快速,处理一个样品只需要约十分钟。RNA纯度高,平均OD260/280一般都在2.0左右,能够有效去除大多数昆虫中的多糖污染。适用于各种昆虫组织,每100mg组织能提取到20~30μg总RNA。得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。细菌总RNA提取试剂盒:本试剂盒可以快速从细菌体内提取总RNA。温州天津RNA提取试剂
总RNA提取试剂,适用于动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提,可有效防止RNA在提取过程中的降解。唐山RNA提取试剂厂家现货
总RNA提取试剂试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7kb和15kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间(tRNA,5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通琼脂糖凝胶电泳,28S的位置大约在2kb,18S大约在1kb的位置,不同浓度的凝胶位置变化较大。注意事项:样品用总RNA提取试剂匀浆后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一个月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短,容易降解,建议提取后尽快进行后续实验,如反转录成cDNA,NorthernBlot等唐山RNA提取试剂厂家现货
Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,压制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。异硫氰酸胍氯化铯超速离心法:原理:使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效压制RNA酶的活性,经过起始密度为1.78g/ml的氯化铯介质,进行密度梯度超速离心,RNA沉淀于管底,而...