江苏缓冲液答疑解惑

HBSS 与 EBSSHanks 的平衡盐溶液（HBSS）和 Earle 的平衡盐溶液（EBSS）都是等渗溶液，用于维持生物应用中的渗透压和 pH 值。虽然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氢钠，用于短期维持生长培养基以外的细胞，但 EBSS 在 5% CO2 下使用，而 HBSS 包含较少的碳酸氢钠，可以在没有 CO2 的情况下使用。从各种依应用而定的配方中进行选择。

Dulbecco 的磷酸盐缓冲液（DPBS）DPBS 与 PBS 的不同之处在于它还包括氯化钾，并且提供多种配方。它也用于生物应用，水基缓冲液，包括氯化钠和磷酸盐缓冲液。 什么是缓冲溶液?请简述其在生物体中的作用。江苏缓冲液答疑解惑

只要知道缓冲对的PH值，和要配制的缓冲液的pH值（及要求的缓冲液总浓度），就能按公式计算[盐]和[酸]的量。这个算法涉及对数换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系并列出了表格。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算出所用缓冲剂的比例和用量。例如配制100nm pH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升（1M=1 mol/L），而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml 0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。计算好后，按计算结果准确称好固态化学成分，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入100ml容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，就能得到所需的缓冲液。各种缓冲溶液的配制，均按表格按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确浓度才能进行，如醋酸、氢氧化钠等。另外，所有缓冲溶剂的配制计量都能从以上的算式准确获得。 [2]山东PBS缓冲液在生化研究工作中，常常需要使用缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。

在前面提到，将等式同时取对数，并简化就可以得到： 或者这就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是，式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度，除了酸性过于强的情况下，由于同离子效应的存在，一般都可用此式计算，根据此式可得出下列几点结论：1 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定，但酸和盐的比例不同时，就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PKa值相同。2 酸和盐浓度等比例增减时，溶液的pH值不变。3 酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为比较高，比例相差越大，缓冲效率越低，缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]

pH缓冲液的配制及其保存：1.pH标准物质应保存在干燥的地方，如混合磷酸盐pH标准物质在空气湿度较大时就会发生潮解，一旦出现潮解，pH标准物质即不可使用。2.配制pH标准溶液应使用二次蒸馏水或者是去离子水。如果是用于0.1级pH计测量，则可以用普通蒸馏水。3.配制pH标准溶液应使用较小的烧杯来稀释，以减少沾在烧杯壁上的pH标准液。存放pH标准物质的塑料袋或其它容器，除了应倒干净以外，还应用蒸馏水多次冲洗，然后将其倒入配制的pH标准溶液中，以保证配制的pH标准溶液准确无误。4.配制好的标准缓冲溶液一般可保存2—3个月，如发现有浑浊、发霉或沉淀等现象时，不能继续使用。5.碱性标准溶液应装在聚yi烯瓶中密闭保存。防止二氧化碳进入标准溶液后形成碳酸，降低其pH值。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。

pH标准液如何正确使用及其主要作用

pH标准液是一种能使pH值保持稳定的溶液。如果向这种溶液中加入少量的酸或碱，或者在溶液中的化学反应产生少量的酸或碱，以及将溶液适当稀释，这个溶液的pH值基本上稳定不变，这种能对抗少量酸碱或大或稀释，而使pH值不变化的溶液就称为缓冲溶液。   pH标准液的如何正确使用：  1、复合电极不用时，可充分浸泡溶液中。切忌用洗涤液或其他吸水性试剂1/4浸洗。   2、使用前，检查玻璃电极前端的球泡。正常情况下，电极应该透明而无裂纹；球PH计标准液配制泡内要充满溶液，不能有气泡存在。   3、测量浓度较大的溶液时，尽量缩短测量时间，用后仔细清洗，防止被测液粘附在电极上而污染电极。   4、清洗电极后，不要用滤纸擦拭玻璃膜，而应用滤纸吸干，避免损坏玻璃薄膜、防止交叉污染，影响测量精度。   5.测量中注意电极的银一氯化银内参比电极应浸入到球泡内氯化物缓冲溶液中，避免电计显示部分出现数字乱跳现象。使用时，注意将电极轻轻甩几下。 PBS缓冲液是一种常用的生物学缓冲液。海南DPBS缓冲液常用知识

在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值。江苏缓冲液答疑解惑

    磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠，与磷酸氢二钠。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠，加水使溶解成1000ml。取上述甲液，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至。磷酸盐缓冲液()取，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，用水稀释至100ml，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钠、磷酸氢二钠，加水使溶解成400ml，即得。磷酸盐缓冲液(含胰酶)()取磷酸二氢钾；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。磷酸盐缓冲液()取，加，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，加，用水稀释至100ml，即得。磷酸盐缓冲液()取，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸氢二钠，调节pH值至，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，加，用水稀释至200ml，即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾，加水使溶解成1000ml，取50ml，加，再加水稀释至200ml，即得。磷酸盐缓冲液()甲液：取磷酸氢二钠，加水溶解，并稀释至500ml。乙液：取磷酸二氢钠，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液，摇匀，即得。磷酸盐缓冲液(～)取磷酸氢二钾。江苏缓冲液答疑解惑