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做ELISA确定抗原**佳包被浓度,做方阵滴定具体怎么做呢?选择好一份已知为阳性和阴性背景的标本,将你的抗原用1*CBPH=*PBPH=(8个条件)后加入96孔板每孔100ul。(一般包被浓度100ng抗原或抗体/孔,**优包被条件需进行试验选择)4度过夜取出后甩干,加入20%NBS封闭每孔200ul。37度2h热封,甩去后拍干即可。将你HRP或AP标记的抗原或二抗用酶标稀释液进行稀释(倍比稀释4个梯度)即可。棋盘滴定就是板酶交叉,同时带上阳性、阴性通过试验确定**佳P/N的包被搭配E的试验2.抗原和抗体**佳工作浓度的确定?抗原抗体反应要求在**适比例条件下进行,ELISA反应试剂多,其工作浓度不同对结果影响较大,因此必须对包被抗原(抗体)和酶标抗体(抗原)进行**佳工作浓度的滴定和选择,以达到**佳的测定条件。?1)方阵(棋盘)滴定法选择包被抗原的工作浓度用包被液将抗原作一系列稀释。试述缓冲溶液在实验中的作用?陕西无酚红缓冲液答疑解惑

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pbs缓冲液的配制配方是10X的PBS母液,然后再对其母液进行1:10稀释即可获得PBS缓冲液。PBS是磷酸盐缓冲液(PhosphateBufferSaline),是生物学实验室**常用的缓冲液之一。其主要成分包括:氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)和磷酸二氢钾(KH2PO4)。配制步骤:清洗干净所需烧杯、转子和量筒,向一个烧杯装少量去离子水(约100ml)并放入一个转子后放在称量天平旁备用;向另一个烧杯装约800ml去离子水并在微波炉或者水浴锅(65°以上均可)中加热。注意:由于实验室所购买的Na2HPO4常常带有二水、七水或者十二水,与之对应的重量分别为1.78g、2.68g、3.58g。向烧杯中加入预热的去离子水,烧杯放置在磁力搅拌器上搅拌溶解。用量筒定容到1L,保存备用。取100ml10X的PBS母液,加入900ml去离子水即可获得pH=7.4的PBS缓冲液(无需用pH计校准PH值)。贵州PBS缓冲液一般多少钱PBS缓冲液的离子浓度与人体血液相似。

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缓冲溶液的pH通常由酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度以及所在的环境、温度等因素来决定;4.75~7.25属于正常ph范围内。缓冲溶液是由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。缓冲溶液的pH值在一定的范围内不因稀释或外加少量的酸或碱而发生***的变化,缓冲溶液依据共轭酸碱对及其物质的量不同而具有不同的pH值和缓冲容量。1、酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不变。2、酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为比较高,比例相差越大,缓冲效率越低。

    从中选取包被抗体浓度和酶标抗体的稀释度。为了进一步节省试剂,可以此浓度为基点,缩小间距再进一步做棋盘滴定。?2测定方法的标准化?2.1加样?????ELISA中除了包被外,一般需进行96孔加样。定性测定中有时不强调加样量的准确性。例如规定为加样1滴,如不具备相当的条件,要尽量使用相同口径的滴管,保持准确的加样姿势,使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中,加样量应力求准确,**好采用量程准确的微量移液器。加样时应将液体加在孔底,不要加在孔壁上部,避免出现气泡。?2.2保温?????在ELISA中,一般在加标本和结合物后,反应的温度和时间应按规定的要求,保温容器**好是水浴箱,可使温度迅速平衡。各ELISA板不应叠在一起。为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。如用保温箱,空湿盒应预先放在其,以平衡温度。?2.3洗涤?????洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却是决定实验成败的关键。在标本和结合物的稀释液和洗涤液中加入聚山梨酯一类物质即避免非特异性吸附,在ELISA中**为常用。ELISA板的洗涤一般可采用以下方法:吸干孑L内反应液;将洗涤液注满板孔;发表评论请自觉遵守互联网相关的政策法规,严禁发布***、**、反动的言论。PBS溶液一般指磷酸缓冲盐溶液,不可以喝。

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    PBS缓冲液什么是PBS缓冲液?PBS缓冲液是一种常用的生物化学缓冲液,全称为磷酸盐缓冲液(PhosphateBufferedSaline)。PBS缓冲液主要由磷酸盐、盐和水组成,pH值一般在。它被***用于生物实验室中,用于稀释、洗涤和储存生物样品,保持生物样品的稳定性和活性。PBS缓冲液的组成PBS缓冲液的主要成分包括三个部分:1.磷酸盐:PBS缓冲液中的磷酸盐是为了维持缓冲液的酸碱平衡。磷酸盐能够抵抗外界酸碱环境的影响,并且能够稳定细胞的PH值,保护细胞免受外界环境的伤害。2.盐:PBS缓冲液中的盐主要是氯化钠(NaCl),用于调节PBS缓冲液的离子浓度。PBS缓冲液中的适当离子浓度可以提供细胞所需的离子环境,维持细胞的生理功能。3.水:水是PBS缓冲液的基础成分,用于稀释磷酸盐和盐。纯净的水可以保证PBS缓冲液的质量,避免其他杂质对实验结果的影响。 配制缓冲溶液作用有哪些?天津缓冲液牌子

缓冲液(Buffer solution)通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液。陕西无酚红缓冲液答疑解惑

PH计校正的标准缓冲液有几种?

ph计校正常用的三种标准溶液:pH分别为4.0、7.0和10.0一般4.0的可以用邻苯二甲酸氢钾体系配制,7.0的用磷酸二氢钾-磷酸氢二钠体系配制,10.0的用碳酸钠-碳酸氢钠体系配制,可以根据需要的缓冲容量确定浓度。校正pH计所用工具和原料:标准缓冲液(应选择与供试液pH值接近的标准缓冲液),目前标准溶液有7种,在我国一般使用以下3种溶液:(pH值在25℃时)1)邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)pH4.003;0.05M2)混合磷酸盐(Na2HPO4):磷酸二氢钾和磷酸氢二钠混合盐溶液pH6.864;0.025M3)硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182;0.01M 陕西无酚红缓冲液答疑解惑

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