海南HBSS缓冲液常用知识

ph值测定常用的标准缓冲溶液有哪几种

ph值测定常用的标准缓冲溶液草酸盐标准缓冲溶液酒石酸盐标准缓冲溶液苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液磷酸盐标准缓冲溶液硼酸盐标准缓冲溶液氢氧化钙标准缓冲溶液在一定程度上能抵抗外加少量酸、碱或稀释，而保持溶液pH值基本不变的作用称为缓冲作用。具有缓冲作用的溶液称为缓冲溶液。缓冲溶液性质a.抗酸/碱,抗稀释作用因为缓冲溶液中具有抗酸成分和抗碱成分，所以加入少量强酸或强碱，其pH值基本上是不变的。稀释缓冲溶液时，酸和碱的浓度比值不改变，适当稀释不影响其pH值。b.缓冲容量缓冲容量是衡量缓冲溶液缓冲能力大小的尺度。缓冲容量的大小与缓冲组分浓度和缓冲组分的比值有关。缓冲组分浓度越大，缓冲容量越大；缓冲组分比值为1时，缓冲容量比较大。 生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羟甲基氨基甲烷）等系统。海南HBSS缓冲液常用知识

    Buffer组份浓度：137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量：1L配制方法：1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将pH值调节至，然后加入去离子水将溶液定容至1L。4.高温高压**后，室温保存。注意：上述Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸铵组份浓度：10M醋酸铵配制量：100ml配制方法：1.称量g醋酸铵置于100～200ml烧杯中，加入约30ml的去离子水搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。3.使用mm滤膜过滤**。4.密封瓶口于室温保存。注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法：1.使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。2.操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。安徽PBS缓冲液常见问题多种细胞只能在很小的PH范围内活动，需要有缓冲体系来维持整个过程不受干扰。

    法兰10沿圆周方向排列开设有固定孔18，固定孔18位于密封垫圈二19的外侧，通过密封垫圈二19起到密封的作用；顶盖9：顶盖9置于法兰10的上表面，顶盖9上表面边沿的通孔内沿圆周方向排列设有固定螺栓6，固定螺栓6的底端穿过固定孔18延伸至法兰10的下表面，固定螺栓6的底端设有螺母5，顶盖9上表面的一侧设有进液管7，进液管7的底端与筒体3的内腔连通，进液管7的顶端设有密封盖8，通过密封盖8对进液管7进行密封，顶盖9下表面的中部设有搅拌单元17，搅拌单元17包括伺服电机171、搅拌轴172和叶片173，搅拌轴172通过轴承转动连接在顶盖9下表面的中部，叶片173阵列设在搅拌轴172的圆周面，伺服电机171固定在顶盖9的上表面，伺服电机171的输出轴与搅拌轴172的顶端固定连接，伺服电机171的输入端与plc控制器2的输出端电连接，通过伺服电机171的转动，带动搅拌轴172和叶片173的转动，可以对筒体内的液体进行搅拌；出液斗11：出液斗11设在固定座1的底部，出液斗11的顶端与筒体3的内腔连通，出液斗11的底端设有出液管13，出液管13上对应设有电磁阀12，通过出液斗11和出液管13将液体排出，通过电磁阀12控制出液管13的开闭；其中：还包括plc控制器2，plc控制器2设在固定座1的上表面。

    3.高温高压**后，4℃保存。SolutionI(质粒提取用)组份浓度：25mMTris-HCl（),10mMEDTA,50mMGlucose配制量：1L配制方法：1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。2.高温高压**后，4℃保存。3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA（20mg/ml)。SolutionII(质粒提取用)组份浓度：200mMNaOH，1%(W/V)SDS配制量：500ml配制方法：1.量取下列溶液，置于500ml烧杯中10%SD50ml2NNaOH50ml2.加**水定容至500ml，充分混匀3.室温保存，此溶液保存时间比较好不要超过一个月注意：SDS易产生气泡，不要剧烈搅拌SolutionIII(质粒提取用)组份浓度：3MKOAc,5MCH3COOH配制量：500ml配制方法：1.称量下列试剂，置于500ml烧杯中。2.加入300ml去离子水后搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至500ml。4.高温高压**后，4℃保存。MEDTA()组份浓度：MEDTA配制量：1L配制方法：1.称取gNa2EDTA·2H2O，置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌。3.用NaOH调节pH值至（约20gNaOH)。注意：pH值至，EDTA才能完全溶解。4.加去离子水将溶液定容至1L。5.适量分成小份后，高温高压**。6.室温保存。1MDTT组份浓度：1MDTT配制量：20ml配制方法：1.称取gDTT，加入到50ml塑料离心管内。2.加20ml的MNaOAc（)。pH计校准的正确顺序是:先用pH7.0缓冲溶液校准,再用pH4.0或pH10.0缓冲溶液校准。

PBS缓冲液，是生物化学研究中使用**为***的一种缓冲液，主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离，缓冲的pH值范围很广，而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2，以提供二价阳离子。

配制方法播报称取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸馏水中，用HCl调节溶液至7.4，***加蒸馏水定容至1L即可得0.01M PBS缓冲液。作用播报PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称，不仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用，蒸馏水不具有盐平衡作用，可以破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在**适条件下参与生物反应，所以使用PBS是优先。在细胞培养中，它通常用于洗涤传代培养中的细胞，以及在计数细胞时作为稀释溶液。 [2]PBS也不是***的，有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持比较好的条件保证生物活性物质保持其**完整的特性 [1]。 一种溶液是否是缓冲溶液，可以通过在溶液中加入少量的酸或碱，观察pH值的变化来判断。山西HBSS缓冲液包括

PBS缓冲液是一种常用的缓冲剂,用于调节pH值和保持溶液的稳定性。海南HBSS缓冲液常用知识

    所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。3.苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到，苯酚平衡操作方法如下：①液化苯酚应贮存于-20℃，此时的苯酚呈结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羟基喹啉（8-Quinolinol）至终浓度。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色，有助于方便识别有机相。③加入等体积的1MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。④重复操作步骤③。⑤加入等体积的MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。⑥重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于。⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)配制方法：1.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。海南HBSS缓冲液常用知识