1:50~l:800)后,按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照),保温,洗涤。加工作浓度酶标抗体,洗涤,加底物显色,加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值;为0.8左右,阴性参考血清A值<0.1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg/L、lmg/L、/L三个浓度按行包被,每一个浓度包被三行(每行3孔),分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原,弱阳性抗原和阴性对照,将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度,分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色,加酸终止反应,分别读取A值。以强阳性抗原液A值在,阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1.1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择:①用IgG进行包被,洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。③加酸终止反应后,读取吸光度(A)。读取A值在1.0时的酶标抗体稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。宁夏EBSS缓冲液包括什么
pH标准液如何正确使用及其主要作用
pH标准液是一种能使pH值保持稳定的溶液。如果向这种溶液中加入少量的酸或碱,或者在溶液中的化学反应产生少量的酸或碱,以及将溶液适当稀释,这个溶液的pH值基本上稳定不变,这种能对抗少量酸碱或大或稀释,而使pH值不变化的溶液就称为缓冲溶液。 pH标准液的如何正确使用: 1、复合电极不用时,可充分浸泡溶液中。切忌用洗涤液或其他吸水性试剂1/4浸洗。 2、使用前,检查玻璃电极前端的球泡。正常情况下,电极应该透明而无裂纹;球PH计标准液配制泡内要充满溶液,不能有气泡存在。 3、测量浓度较大的溶液时,尽量缩短测量时间,用后仔细清洗,防止被测液粘附在电极上而污染电极。 4、清洗电极后,不要用滤纸擦拭玻璃膜,而应用滤纸吸干,避免损坏玻璃薄膜、防止交叉污染,影响测量精度。 5.测量中注意电极的银一氯化银内参比电极应浸入到球泡内氯化物缓冲溶液中,避免电计显示部分出现数字乱跳现象。使用时,注意将电极轻轻甩几下。 云南缓冲液介绍缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。
磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠,与磷酸氢二钠。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸,加水至1000ml,摇匀。乙液:取磷酸氢二钠,加水使溶解成1000ml。取上述甲液,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至。磷酸盐缓冲液()取,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钠、磷酸氢二钠,加水使溶解成400ml,即得。磷酸盐缓冲液(含胰酶)()取磷酸二氢钾;另取胰酶10g,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得。磷酸盐缓冲液()取,加,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加,用水稀释至100ml,即得。磷酸盐缓冲液()取,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸氢二钠,调节pH值至,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加,用水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液()取磷酸二氢钾,加水使溶解成1000ml,取50ml,加,再加水稀释至200ml,即得。磷酸盐缓冲液()甲液:取磷酸氢二钠,加水溶解,并稀释至500ml。乙液:取磷酸二氢钠,加水溶解,并稀释至100ml。取上述甲液,摇匀,即得。磷酸盐缓冲液(~)取磷酸氢二钾。
PBS缓冲液的性质和优点4.无毒性:PBS缓冲液是一种非常安全的缓冲液,对生物样品和细胞没有毒性。5.维持稳定性:PBS缓冲液能够维持生物样品的稳定性,防止样品的变性和降解。6.pH稳定:PBS缓冲液的pH值一般在7.2-7.4之间,非常适合细胞和生物样品的生长和保存。7.离子平衡:PBS缓冲液中的适当离子浓度可以提供细胞所需的离子环境,维持细胞的正常生理功能。8.易于制备:PBS缓冲液的制备非常简单,只需要将磷酸盐和盐溶解在适量的水中即可。PBS溶液一般指磷酸缓冲盐溶液,不可以喝。
缓冲液浓度和温度的影响浓度影响:缓冲液的浓度会影响其缓冲能力。浓度过高或过低都可能影响实验结果。因此,需要根据实验需求精确计算缓冲液的浓度,以确保其既能有效维持pH稳定,又不会对实验造成干扰。温度影响:温度的变化也会影响缓冲液的pH值。例如,Tris缓冲液的温度效应大,温度变化会导致pH值的变化,因此在配制和使用时需要考虑温度的影响。6综上所述,缓冲液在酶活性实验中扮演着至关重要的角色,它不仅为酶提供了一个**适的pH环境,还通过其抗酸抗碱能力维持实验环境的稳定。选择合适的缓冲液、控制其浓度和温度是确保酶活性实验准确性的关键。生化实验中加入缓冲液的目的和作用。天津缓冲液介绍
缓冲液(Buffer solution)通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液。宁夏EBSS缓冲液包括什么
PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液,一般选择Na2HPO4和KH2PO4配制,因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液,称量不同质量的磷酸盐,也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。
配置方法播报编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步骤进行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 将18.2%(体积分数)KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合; 宁夏EBSS缓冲液包括什么