假设缓冲溶液里含有弱酸HA以及它的共轭碱。在溶液里发生的质子反应为:水合氢离子的浓度取决于弱酸与其共轭碱的浓度比。当加入少量强碱时,酸被中和,导致了氢氧根离子在溶液中很少累积,从而的浓度增加,的浓度减少。可以看到,虽然加入了强碱,但是溶液里的氢氧根离子变化很少,同时, 浓度较大,相对的变化小,两者比值几乎无变化,因此根据公式,水合氢离子的浓度变化很小。加入弱酸则是同样的道理。由于在 大浓度基数上的微小变化不会改变比值,也因此维持了体系内氢离子和氢氧根离子浓度的平衡。 [1]PBS缓冲液中的磷酸盐和盐水可以维持实验体系的离子强度稳定。山东DPBS缓冲液哪家好
pH缓冲液的配制及其保存:1.pH标准物质应保存在干燥的地方,如混合磷酸盐pH标准物质在空气湿度较大时就会发生潮解,一旦出现潮解,pH标准物质即不可使用。2.配制pH标准溶液应使用二次蒸馏水或者是去离子水。如果是用于0.1级pH计测量,则可以用普通蒸馏水。3.配制pH标准溶液应使用较小的烧杯来稀释,以减少沾在烧杯壁上的pH标准液。存放pH标准物质的塑料袋或其它容器,除了应倒干净以外,还应用蒸馏水多次冲洗,然后将其倒入配制的pH标准溶液中,以保证配制的pH标准溶液准确无误。4.配制好的标准缓冲溶液一般可保存2—3个月,如发现有浑浊、发霉或沉淀等现象时,不能继续使用。5.碱性标准溶液应装在聚yi烯瓶中密闭保存。防止二氧化碳进入标准溶液后形成碳酸,降低其pH值。北京EBSS缓冲液是什么通过选择合适的缓冲液可以确保酶在条件下进行催化反应。
分析测试中,在络合滴定和分光光度法等许多反应里都要求溶液的pH值保持在一个范围内,以保证指示剂的变色和显色剂的显色等,这些条件都是通过加入一定量的缓冲溶液达到的,所以缓冲溶液是分析测试中经常需要的一种试剂。 采用电位滴定法测定外加酸或碱对不同配比同一种缓冲溶液的滴定曲线,不仅有助于理解缓溶液及缓冲容量的概念而且对分析测试中正确选缓冲溶液的配制方法及用量具有指导意义。 [3]采用电位滴定法测定缓冲溶液的滴定曲线,选择 了常见的氨水-氯化铵缓冲溶液,分别按照不同的配比得到4种缓冲溶液,实验测定了强酸、强碱对缓冲 溶液的滴定曲线,滴定结果直观清晰,对理解缓冲容 量的概念及实践中缓冲溶液的选择有积极的意义。 [3]
生化实验中加入缓冲液的目的和作用生物缓冲液是一种能够保持pH值不受酸碱度影响的溶液,多种细胞只能在很小的PH范围内活动,需要有缓冲体系来维持整个过程不受干扰。尤其是在生化实验中,生物缓冲液极其受重视,因为实验中的各类物质非常容易使PH发生变化,而这就直接影响到整体工作进程。例如在酶活性实验中,有时因为PH的变化大,会使酶活性下降甚至失活,导致实验无法进行下去,所以在生化实验中加入缓冲液的主要目的就是维持PH的稳定。缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化.
Buffer组份浓度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将pH值调节至,然后加入去离子水将溶液定容至1L。4.高温高压**后,室温保存。注意:上述Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸铵组份浓度:10M醋酸铵配制量:100ml配制方法:1.称量g醋酸铵置于100~200ml烧杯中,加入约30ml的去离子水搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。3.使用mm滤膜过滤**。4.密封瓶口于室温保存。注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法:1.使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。2.操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。缓冲液的浓度会影响其缓冲能力。广东EBSS缓冲液常见问题
磷酸缓冲盐溶液一般作为溶剂,起到溶解保护试剂的作用。山东DPBS缓冲液哪家好
做ELISA确定抗原**佳包被浓度,做方阵滴定具体怎么做呢?选择好一份已知为阳性和阴性背景的标本,将你的抗原用1*CBPH=*PBPH=(8个条件)后加入96孔板每孔100ul。(一般包被浓度100ng抗原或抗体/孔,**优包被条件需进行试验选择)4度过夜取出后甩干,加入20%NBS封闭每孔200ul。37度2h热封,甩去后拍干即可。将你HRP或AP标记的抗原或二抗用酶标稀释液进行稀释(倍比稀释4个梯度)即可。棋盘滴定就是板酶交叉,同时带上阳性、阴性通过试验确定**佳P/N的包被搭配E的试验2.抗原和抗体**佳工作浓度的确定?抗原抗体反应要求在**适比例条件下进行,ELISA反应试剂多,其工作浓度不同对结果影响较大,因此必须对包被抗原(抗体)和酶标抗体(抗原)进行**佳工作浓度的滴定和选择,以达到**佳的测定条件。?1)方阵(棋盘)滴定法选择包被抗原的工作浓度用包被液将抗原作一系列稀释。山东DPBS缓冲液哪家好