从而提高菌株增殖速率,但是浓度过大会导致抑菌现象,后期菌株增殖放缓,以产酸为主,2-羟基乙胺还能够作为阳离子表面活性剂,使得细胞壁疏松,提高细胞通透性,促进谷氨酸释放到发酵液,从而提高了谷氨酸产量和糖酸转化率。三、通过上述实验确定cecl3添加量为10mg/l、2-羟基乙胺的添加量40mg/l,在此基础上,研究发酵培养基b对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。对照组1采用发酵培养基a进行发酵,不采用发酵培养基b,100l发酵罐中含有70l发酵培养基a;发酵工艺参照实施例1。对照组2:发酵培养基b中不添加琥珀酸,其余同实施例1。对照组3:发酵培养基b中不添加壳聚糖,其余同实施例1。对照组4:发酵培养基a中添加5g/l的琥珀酸,其余同对照组1。实验组为实施例1。具体结果见表1。表1组别菌浓度od600nm谷氨酸产量g/l糖酸转化率%对照组:对照组1采用单一发酵培养基发酵,谷氨酸产量和糖酸转化率明显低于实验组,各组别菌体浓度差异并不大;对照组4在对照组1的基础上添加了琥珀酸,对菌体浓度并没有影响,谷氨酸产量和糖酸转化率也没有明显差异,可能原因是,发酵前期以菌体增殖为主,产酸较少,琥珀酸对菌体增殖并没有明显的刺激作用。MEM培养基含有多种必需的营养成分。中国香港减血清培养基供应商
c、结果为:在用未调ph液体培养基进行培养时,整体长势从优至弱分别为1/2cs未调ph液体培养基、cs未调ph液体培养基、1/2ms未调ph液体培养基、ms未调ph液体培养基;在用ph调至,整体长势从优至弱分别为1/、、1/、;不论是否调ph至,cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于ms液体培养基;不论是否调ph至,1/2cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于1/2ms液体培养基。如图9和图10所示。说明,1/2cs液体培养基和cs液体培养基应用于植物水培时,不论是否调节ph至,均能获得很好的培养效果,克服了传统液体培养基必须调节ph后才适用于植物水培的缺点。**后说明的是,以上实施例*用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而其不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,则均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。山东培养基牌子使用减血清培养基能减少实验的变异性。
7)溶液应在2℃-8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。2)配制可高压**细胞培养基(1)根据所需将培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)将袋内残留培养基洗下,并入容器。加注射用水至总体积的95%,轻微搅拌溶解。(2)在121℃、15psi下**15分钟。(3)待溶液冷却至室温,加入无菌mol/LL-谷氨酰胺溶液规定体积、无菌%(w/v)碳酸氢钠溶液规定体积,加注射用水(20℃~30℃)至规定体积,混匀。(4)如果必要,用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至所需值。(5)溶液应在2℃-8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。注意事项1)细胞培养用水一般为三蒸水(经石英蒸馏器蒸馏)或超纯水,医*生产上一般为注射用水。2)建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用,因为包装一旦打开,组分可能会变质或因受潮而结团。3)溶解干粉培养基时先加入终体积90%-95%的培养用水,添加剂加完后再补足。4)如需添加的组分较多时,某一组分完全溶解后,再添加另一组分。5)待培养基完全溶解后再加入碳酸氢钠,以免产生沉淀。6)所有成分完全溶解后,培养基应立即过滤或高压**,以免产生沉淀或有微生物污染。7)在过滤**时。
在s3中,将s2中消毒的外植体接入诱导培养基中培养,诱导培养基的配方为ms+,诱导培养基的ph值为,在s4中,将s3中的无菌外植体转接到增殖培养基中,增殖培养基的配方为ms+~~,增殖培养基的ph值为,在s5中,将s4中的绣球组培苗放入生根培养基中,生根培养基的配方为1/2ms+~~,生根培养基ph值为。通过采用上述技术方案,通过液体**培养技术,以芽为原材料,获取方便,增殖倍率高达8~10倍,生根率达到95%以上,苗木规格整齐,性状保持稳定,同时节省成本,适合工厂化大规模生产质量绣球种苗。诱导培养基萌芽率能达到90%,可以成功建立无菌再生体系。使用本增殖培养基,绣球组培苗增殖倍率能够达到8~10倍,组培苗高度一致,生长健壮。使用本生根培养基,绣球组培苗生根率能够达到95%,根系发达,健壮,可以成功用于移栽大棚。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为:在s3中,将s2中消毒的外植体接入诱导培养基中后的培养环境为在光照强度1500lux条件下,温度25℃,光照时间16h;黑暗条件下,温度23℃,光照时间8h,培养6~8周。通过采用上述技术方案,在该培养条件下能够有效避免诱导培养阶段植物材料出现应激反应,植物材料能够快速适应诱导培养基。减血清培养基减少了血清对细胞培养的干扰。
愈伤**诱导率为100%。如图6所示。对比培养例6:将cs基本培养基替换为ms基本培养基,其余完全同培养实例6,ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为:本氏***叶片愈伤**诱导时,培养15-18d的叶片略微增厚,在叶片四周产生较少的淡绿色愈伤**,愈伤**诱导率为90%,在愈伤**团块上产生的嫩绿色不定芽数量较少;本氏***根愈伤**诱导时,培养9-11d在切口处产生大量淡黄色致密的愈伤**,愈伤**诱导率为100%。如图6所示。培养实例6和对比培养例6的诱导结果比较:用上述方法进行本氏***叶片愈伤**诱导时,cs诱导培养基愈伤**诱导率为100%,而ms诱导培养基的诱导率*为90%,在所述相同培养条件下,与ms诱导培养基相比,cs诱导培养基可更快诱导出大量致密的叶片愈伤**、产生更多的不定芽;用上述方法进行本氏***根愈伤**诱导时,cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的根愈伤**形态相近,两种培养基的根愈伤**诱导率均为100%。如图6所示。培养实例7:水稻成熟胚愈伤**诱导(1)水稻种子消毒及筛选:a、选种:以籼稻缙恢10号为例,将水稻种子晾晒干燥后于4℃下长期保存,挑选籽粒饱满、大小基本一致的水稻种子,用剪刀从种子中部剪开,去除谷壳。F12培养基在细胞分化研究中表现优越。宁夏MEM a培养基供应商
无酚红培养基在细胞实验中减少了不必要的干扰。中国香港减血清培养基供应商
微量元素在细胞内通常以与有机物结合的形式存在。其中铁在细胞中参与氧的转运;钴是维生素B12的组成部分,参与叶酸的合成和脂肪酸的合成;镍能够***脱氧核糖核酸酶、乙酰辅酶A合成酶等在细胞内具有重要功能的酶,还具有稳定核酸结构的功能;亚硒酸钠中的硒,作为谷胱甘肽过氧化物酶的辅基,具有抗过氧化物能力,参与消除细胞内的脂肪酸过氧化物,提高细胞的生长速率和活性。在低血清、无血清细胞培养基中,为满足细胞生长增殖需要,常常添加一些成份:蛋白质、多肽、核苷、嘌呤、柠檬酸循环的中间产物、脂类、及一些血清替代因子等。其中蛋白质具有重要的作用,动物细胞对许多物质(难溶于水的离子或脂类物质)的摄取需要借助蛋白质的传递作用,如白蛋白、传递蛋白、贴壁蛋白等能够携带脂肪酸、***、矿物质等促进细胞生长。转铁蛋白是一种重要的传递蛋白,能够结合铁,促进细胞对铁离子的吸收,并具有***作用,其促生长作用可能与其具有生长因子的功能有关。胰岛素可促进细胞对葡萄糖和氨基酸的利用,商业化中一些生长因子以重组蛋白形式添加到培养基中,主要用来刺激细胞增殖,并可促进糖元和脂肪酸的合成。乙醇胺是一种重要的刺激细胞生长的化合物,是脑磷酸的合成前提。中国香港减血清培养基供应商