外泌体研究常见问题解答61.如何鉴定提取出来的外泌体？根据MISEV2023，鉴定外泌体首先需要通过WB来鉴定细胞外囊泡的标志蛋白是否存在于样品中，通过电子显微镜来观察样品中细胞外囊泡的形态特征，通过NTA等手段来分析样品中细胞外囊泡的群体特征（粒子浓度、直径分布等）。一般从外泌体形态、外泌体粒径和外泌体标志物来鉴定。（1）鉴定外泌体形态：通常使用透射电镜检测（TEM）；（2）鉴定外泌体粒径（大小）和浓度：可以使用纳米颗粒跟踪分析（NTA）、纳米流式、纳米库尔特粒度仪检测；（3）鉴定动物细胞外泌体标志物：通常使用WB检测外泌体标志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix等），按...

如何避免外泌体活性下降，这款保存液告诉你答案~好不容易分离出来的外泌体PBS重悬保存在-80℃，保存了两周实验就做不出来了怎么办？快来试试维思克思的外泌体保存液吧！操作简便，直接混入外泌体样本后置于-20℃、-80℃冻存，可明显改善外泌体活性、完整性及稳定性！操作简便，可直接按比例混入外泌体样本中，无需过多操作；保护效果好，使用后外泌体生物活性稳定，多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异；适用样本范围广，可适用于所有外泌体样本（包括植物、动物、微生物、人来源外泌体）。产品信息：WisExoExosomeProtector（WSR0020）外泌体研究工具高效分离技术，缩短实验周期，提...

外泌体研究常见问题解答51.外泌体样品如何保存？长期保存，置于-80℃。冻存前，离心去除细胞和细胞碎片，再将样品分装保存在-80℃。如果条件允许，建议用新鲜样品进行外泌体的分离和后续实验。短期保存（1-2天），置于4℃（确保无菌）。2.分离的外泌体如何保存？（1）使用低吸附离心管或冻存管，减少外泌体粘附。（2）对于短期而言，外泌体可以在4°C下储存长达1周。对于长期储存，外泌体可以在-20°C或-80°C下储存。当长期储存外泌体时，重要的是要考虑它们是否需要多次解冻。如果需要多次应用（因此需要多次解冻）进行分析，我们建议将外泌体悬浮液等分到多个试管中，以便每个试管只经历一个冷冻/解冻循环。多次...

EVs研究中，通常EVs来源，纯化方法，定量技术，给药对象等这些因素都会导致给药剂量的差异。因此建立一个完善给药剂量系统就显得尤为重要。确定EVs有效剂量建议分为两个方向，一个是长期层面；一个是短期层面。长期上需要众多EVs从业者，制定有效的、适用于不同来源、不同生产工艺、不同纯化方法的EVs量化或表征方法，这个层面无法短期内实现。在短期内，比较好购买商品化EVs，或者自己确定固定来源和生产工艺、定量方法的EVs，然后做细胞或动物的量效实验时，做梯度稀释的量效实验，以确定比较好的给药剂量，此方法可以。为尽快解决问题，达到预期实验效果，只能从短期层面考虑。维思克思在外泌体行业深耕近十年，总结出E...

沉淀法外泌体分离试剂盒经典、操作简便的外泌体分离方法！假如你没有超速离心机，假如对提取出的外泌体中含有透明质酸等多糖而头疼不已，那你一定要来试试这款沉淀法分离试剂盒。WSR0026是一款沉淀法外泌体分离试剂盒，可用于多种样本的外泌体分离，具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。使用方法：需要将沉淀试剂加入到样本中孵育，然后高速离心即可得到外泌体。产品优势：适用范围广，血浆、血清等复杂样本和细胞上清、尿液等简单样都适用；回收率高，相较于其他方法，获取的外泌体浓度高；操作简便，不需特殊设备，操作...

外泌体研究常见问题解答145.外泌体RT-qPCR实验是选择哪个靶标作为内参？外泌体没有公认内参，理由如上。常规内参基因在外泌体中表达量甚至可能比目标基因还低。外参是在没有合适内参的情况下的替代物。miRNA检测外参是化学合成的线虫短片段单链RNA(cel-miR-39-3p)在人、小鼠、大鼠中均无同源片段，比较大限度降低了对定量实验造成的干扰。6.外泌体SmallRNA-seq实验，样本量有什么要求？肿瘤细胞系推荐使用40mL以上的初始样品量。某些细胞（如悬浮细胞、干细胞、神经细胞等）中外泌体含量比较低，建议使用100mL的初始样品量。一般需提取到10ng以上的TotalRNA，才可以用于S...

外泌体研究常见问题解答105.外泌体研究，应选用血浆还是血清？血清是血液凝固之后收集的液体，所以其中少了纤维蛋白原，凝血因子，以及多了很多凝血产物。纤维蛋白原可转化为纤维蛋白，具有凝血功能。在凝血过程中血小板会分泌大量的外泌体，有研究发现血清中有接近50%的外泌体来自额外的分泌。血浆=血液-血细胞血清=血浆-纤维蛋白原-凝血因子所以一般实验选择血浆，在特殊情况下，如研究与血小板相关的疾病的时候，当然是血清更适合。6.外泌体血液样本提取需注意事项？全血在长时间放置，冷冻、离心等会发生溶血现象，此时不建议分离外泌体。7.细胞培养去除血清源外泌体？a.将细胞培养用的血清通过100000g超速离心10...

维思克思的外泌体浓缩方案-超滤管02超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术，利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜，利用膜孔的大小选择性，将分子量较大的物质过滤出来，而将分子量较小的物质通过膜孔。本产品基于低蛋白吸附的过滤膜，根据膜的大小规格以达到样本浓缩或分离的效果。具有操作简单，离心时间短，回收率高等特点。可用于生物样品浓缩，分离，蛋白除杂等领域。使用方法：1.样本澄清通过膜过滤样本，使样本澄清，去除杂质。2.超滤管平衡超滤管中加入适量PBS，在转子中离心。移去装置底部PBS。3.样品超滤向超滤管中加入5ml样品，离心。弃除收集管中液体，回收浓缩样品。外泌体研究工具通用型适配设计，兼容...

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大体积外泌体样本量分离方法总结大体积外泌体样本在浓缩后根据不同应用，需衔接不同的外泌体分离方法。维思克思总结出现在常用、简便、效果比较好的三种方法。SEC重力柱是基于分子排阻色谱原理，根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于大体积样本中的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。（WSR0003）SEC离心柱是离心柱式的外泌体分离产品，离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体，实现超快速、高收率的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检...

外泌体研究常见问题解答22.外泌体形成的机制是什么？外泌体通常被描述为通过多囊泡体与质膜融合产生的内吞途径的囊泡，通过多泡体分泌到细胞外的小囊泡。它们是细胞分泌的一个更大的囊泡家族的一部分，包括微泡、外泌体和脱落颗粒，这些囊泡（除外泌体外）来源于质膜的直接出芽。由于这些实体的大小、密度和总体组成的相似性存在重叠，使用目前可用的技术和仪器将其分离是极具挑战性的。3.外泌体和微囊泡的区别是什么？外泌体和微囊泡的区别在于其产生的方式不同。从晚期胞内体分泌的细胞外囊泡称为外泌体，从细胞膜直接出芽产生的细胞外囊泡称为微囊泡。二者的大小也有所不同，外泌体的粒子直径约40-100nm，微囊泡的粒子直径约10...

脐带间充质干细胞外泌体标准品。hUC-MSCsExosome是由人脐带间充质干细胞培养后获得的上清，结合切向流过滤等多种纯化方式获得的高纯度外泌体颗粒，可用于后续实验，包括蛋白或核酸分析、载药研究，以及作为各种实验的参考品等。产品优势：高活性，hUC-MSC来源外泌体，活性高；高纯度，多种纯化原理的方法结合，确保外泌体纯度；高质量，严格的质控、生产和鉴定，确保产品质量。使用方法：将1mL无菌去离子水或注射用水加入到外泌体冻干粉中，完全溶解后，尽快用于后续实验。外泌体研究工具批量采购优惠政策，阶梯式价格体系，量大成本更优。细胞培养上清Extracellular Vesicles定量需离心三次，这...

外泌体RNA研究的正确打开方式外泌体中有许多货物，包含蛋白质、脂质、糖、代谢物和核酸等，从论文发表数量统计来看，外泌体发挥功能的分子机制研究中RNA占比是比较高的。然而外泌体与组织或细胞RNA相比，在提取和质控上差异较大，不能延用目前主流的产品和技术；同时，外泌体RNA质量控制等也缺乏统一的标准化方案，这些因素将阻碍外泌体RNA的研究。外泌体与细胞RNA相比，有一些差异：1.有来自供体细胞或周围环境RNA的污染；2.外泌体RNA非常微量；3.外泌体RNA中小RNA含量比较高；4.常规的RNA质控方法不适用。综上，对外泌体RNA研究人员，需要选择种高特异、高回收的外泌体分离或RNA提取方法，配合...

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。03如何表征考虑到外泌体中其他杂质对定量检测的影响，建议先进行外泌体纯度表征，确保外泌体纯度在合理范围内，再进行外泌体定量。外泌体纯度表征可以用颗粒数/总蛋白、总蛋白/总脂质、颗粒数/总脂质、颗粒数/总核酸、总蛋白/总核酸等，从多个维度来评估外泌体纯度。04如何定量外泌体发挥功能与其所载货物相关，对外泌体定量可以考虑检测外泌体中某些分子来评估。如某些蛋白标志、脂质、核酸、糖类等分子。针对外泌体表征与定量此类问题，维思克思不断尝试，经多次...

外泌体分离提取方法大全外泌体快速、简便、高纯度、高回收率的分离方法是在大规模应用的前提。维思克思编制了外泌体分离方法大全：亲和磁珠法分离（WSR0002-2）能特异性捕获外泌体，实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。凝胶排阻色谱法分离（WSR0003）基于分子排阻色谱（SEC）原理，根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离，可以获取分子大小均一、高纯度的外泌体。特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心法分离（WSP0015/WSP0016）是离心柱式的外泌体分离产品，离心柱中装填的介质能无差别地吸附杂质而不结...

外泌体RNA定量试剂盒外泌体的组成复杂，不*包含脂质和蛋白质，RNA也是其组成部分。从目前文献报道统计结果来看，RNA是外泌体发挥功能的主要物质。研究外泌体RNA组成和含量具有重要意义。从原理上来说，既然蛋白浓度可以一直作为外泌体定量和表征的重要指标。那么用RNA来对外泌体进行定量和表征也是非常可行的。外泌体中包含RNA分子，其在细胞通讯、疾病发展等方面具有重要的研究和应用价值。但目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法，单一的检测技术都有其局限性。WSR0039不需提取外泌体RNA，直接检测微量RNA含量。具有操作简便，灵敏度高，线性范围广，易于检测等特点。该试剂盒的检测线性范围是0-25ng，比...

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。2.单一表征方法的局限性对外泌体的纯度表征目前采用的是外泌体阴性蛋白标志、颗粒蛋白比。外泌体阴性蛋白标志一般采用WB检测，属于定性检测，与样本处理、抗体、显色、曝光时间等多个因素有关，如果作为纯度表征的指标，显然是不合适的。在蛋白聚集体或其他杂质（糖/脂质/核酸等）聚集体/大颗粒较多时，颗粒蛋白比的数值也可能较大，其作为纯度表征指标也有其局限性。既然上述外泌体定量方法、表征方法具有其局限性，那么如何科学的对外泌体进行定量和表征呢？外泌体...

外泌体研究常见问题解答11.外泌体是什么？通常，外泌体被定义为约1.13-1.19g/mL的囊泡（基于密度梯度离心），预期尺寸为30–150nm（基于电镜分析）。由活细胞分泌到细胞外环境的膜性小囊泡，是细胞间信息传递的重要载体，参与细胞间相互作用。几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。根据不同生物来源分类，外泌体分为动物细胞外泌体、植物外泌体、微生物外泌体。动物细胞来源的外泌体也可以通过其表面蛋白标记物来定义和鉴定，这些标记物包括：四跨肽（CD63、CD81、CD9）和其他类似ALIX、TSG101等标记物。目前没有合适的工具，也没有足够的知识来对外泌体做出明确而简单的定义，将其与其他微...

外泌体定量与表征的又一有效补充！外泌体脂质脂质定量试剂盒（比色法）外泌体由磷脂双分子层包裹，包含脂质等代谢物。目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法，单一的检测技术都有其局限性。维思克思的WSR0028可用于外泌体的脂质定量，既可测定外泌体的脂质含量，为脂质研究提供有力工具，又能作为外泌体定量和表征方法的有效补充。现有的脂质定量方法大都需要昂贵的仪器，例如HPLC仪器、光散射检测技术等。本产品可替代这些仪器，实现小成本快速检测！产品特点：灵敏度高，检测脂质浓度下限达到5μg/mL。操作简便，需三步即可检测出脂质含量，整个操作时间不超过40min，节约时间。线性范围广，5-1000μg/mL浓度范围...

外泌体RNA研究的正确打开方式外泌体中有许多货物，包含蛋白质、脂质、糖、代谢物和核酸等，从论文发表数量统计来看，外泌体发挥功能的分子机制研究中RNA占比是比较高的。然而外泌体与组织或细胞RNA相比，在提取和质控上差异较大，不能延用目前主流的产品和技术；同时，外泌体RNA质量控制等也缺乏统一的标准化方案，这些因素将阻碍外泌体RNA的研究。外泌体与细胞RNA相比，有一些差异：1.有来自供体细胞或周围环境RNA的污染；2.外泌体RNA非常微量；3.外泌体RNA中小RNA含量比较高；4.常规的RNA质控方法不适用。综上，对外泌体RNA研究人员，需要选择种高特异、高回收的外泌体分离或RNA提取方法，配合...

SEC法外泌体分离试剂盒。或许你想做外泌体相关研究，却不知如何下手？或许你苦练提纯术却不知如何获得高纯度外泌体？现在可以用UniversalExosomeIsolationKit（SEC外泌体分离试剂盒）来解决以上问题了！本产品分离的外泌体纯度高、回收率高的特点，能够满足绝大多数科研需求。操作简便使用本品时无需复杂设备、从上样到外泌体收集只需半小时。适用范围广适用于各类样本，包括但不限于细胞上清、尿液、血清、血浆等。分离的外泌体结构均一完整、只回收固定范围的外泌体囊泡。使用方法：样品与纯化柱预处理后，按纯化柱规格上样（10mL纯化柱上样1mL；30mL纯化柱上样3mL）。样本滴完后每次加入0....

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。2.单一表征方法的局限性对外泌体的纯度表征目前采用的是外泌体阴性蛋白标志、颗粒蛋白比。外泌体阴性蛋白标志一般采用WB检测，属于定性检测，与样本处理、抗体、显色、曝光时间等多个因素有关，如果作为纯度表征的指标，显然是不合适的。在蛋白聚集体或其他杂质（糖/脂质/核酸等）聚集体/大颗粒较多时，颗粒蛋白比的数值也可能较大，其作为纯度表征指标也有其局限性。既然上述外泌体定量方法、表征方法具有其局限性，那么如何科学的对外泌体进行定量和表征呢？外泌体...

外泌体RNA定量试剂盒外泌体的组成复杂，不*包含脂质和蛋白质，RNA也是其组成部分。从目前文献报道统计结果来看，RNA是外泌体发挥功能的主要物质。研究外泌体RNA组成和含量具有重要意义。从原理上来说，既然蛋白浓度可以一直作为外泌体定量和表征的重要指标。那么用RNA来对外泌体进行定量和表征也是非常可行的。外泌体中包含RNA分子，其在细胞通讯、疾病发展等方面具有重要的研究和应用价值。但目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法，单一的检测技术都有其局限性。WSR0039不需提取外泌体RNA，直接检测微量RNA含量。具有操作简便，灵敏度高，线性范围广，易于检测等特点。该试剂盒的检测线性范围是0-25ng，比...

SEC法外泌体分离试剂盒。或许你想做外泌体相关研究，却不知如何下手？或许你苦练提纯术却不知如何获得高纯度外泌体？现在可以用UniversalExosomeIsolationKit（SEC外泌体分离试剂盒）来解决以上问题了！本产品分离的外泌体纯度高、回收率高的特点，能够满足绝大多数科研需求。操作简便使用本品时无需复杂设备、从上样到外泌体收集只需半小时。适用范围广适用于各类样本，包括但不限于细胞上清、尿液、血清、血浆等。分离的外泌体结构均一完整、只回收固定范围的外泌体囊泡。使用方法：样品与纯化柱预处理后，按纯化柱规格上样（10mL纯化柱上样1mL；30mL纯化柱上样3mL）。样本滴完后每次加入0....

维思克思的外泌体浓缩方案01外泌体浓缩试剂。外泌体浓缩试剂可用于大体积外泌体样本的处理，可以高通量、快速实现大体积外泌体样本（如细胞培养上清、尿液等）的浓缩，浓缩后的样本后处理后可进行外泌体的分离纯化、RNA提取、蛋白提取等后续实验。该浓缩试剂不*操作十分简便、节省时间，而且浓缩效果好，外泌体纯度高。常用于细胞培养上清与尿液的外泌体样本浓缩。一次可至少处理500ml样本。使用方法1.样本预处理样本离心处理三次，破碎去除细胞及大体积颗粒。2.大体积外泌体样本浓缩预处理后的样品按照体积比4:1的比例加入浓缩液（为保证后续实验效果，推荐样本体积不小于24ml），室温共孵育30min。离心，弃上清。3...

外泌体作为近几年的“科研新贵”，可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力，是非常有前途的递送载体。然而，目前在外泌体研究和应用上还存在以下痛点：痛点一：由于目前对这些内源性囊泡了解还不够深入，尤其是在体内行为方面上，将外泌体治zhi疗转诊至临床故而仍为一大难点。体内追踪外泌体可以提供有关其生物分布、迁移能力、毒性、生物学的重要知识角色，沟通能力和行动机制。痛点二：目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料(如PKH系列、Dil系列)，然而这些染料标记方法存在一些不足。维思克思的示踪探针基于两项发明**，对比其他染色方法，该探针具有低背景、高效率、强耐...

相信大家一直都被一个问题困扰，什么样的外泌体才是好的外泌体呢？采购外泌体时，如何判断外泌体质量？现在，我们对外泌体供应商-维思克思的外泌体WSR0014-1进行测评。咱们来看看高质量的外泌体到底长什么样？一、首先对外泌体进行鉴定。首先要证明是外泌体，那如何证明呢？一般从三大基础表征维度进行分析：形态、粒径分布、外泌体标志蛋白。二、确定外泌体颗粒数与纯度。还需另一重要表征维度外泌体的纯度。在做实验时，怎样考察纯度呢？不同来源的外泌体，因获取样本的不一致，每种样本中杂蛋白的含量不尽相同，同时分离方法也不一定相同，这可能导致不一致的实验结果。外泌体纯度表征可以用颗粒数/蛋白、颗粒数/RNA、蛋白/脂...

需离心三次，这么方便的外泌体分离试剂盒你见过吗？为方便各位老师使用我司试剂盒，我司将持续更新各个试剂盒使用教程视频，请各位持续关注哦！维思克思的外泌体分离产品-SEC离心柱法外泌体分离试剂盒，只需要3次低速离心即可实现外泌体的高效分离，你见过吗？详情可联系客服。产品信息：SpinColumnExosomeIsolationKit（WSR0015）；ExoIsoSpinColumn（WSP0015）；ExoIsoSpinColumnPlus（WSP0016）。维思克思生物科技(武汉)有限公司外泌体研究工具长期合作支持政策，持续技术服务，降低长期合作成本。实验室sEVs提取你真的知道如何正确收集和...

如何避免外泌体活性下降，这款保存液告诉你答案~好不容易分离出来的外泌体PBS重悬保存在-80℃，保存了两周实验就做不出来了怎么办？快来试试维思克思的外泌体保存液吧！操作简便，直接混入外泌体样本后置于-20℃、-80℃冻存，可明显改善外泌体活性、完整性及稳定性！操作简便，可直接按比例混入外泌体样本中，无需过多操作；保护效果好，使用后外泌体生物活性稳定，多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异；适用样本范围广，可适用于所有外泌体样本（包括植物、动物、微生物、人来源外泌体）。产品信息：WisExoExosomeProtector（WSR0020）外泌体研究工具原厂直供模式，省去中间商环节，...

外泌体研究常见问题解答72.哪些标记物可用于外泌体表征？检测膜结合或膜相关蛋白，以验证膜的存在。许多外泌体中发现了CD63、CD81和CD9等。然而检测到至少2种不同细胞系释放CD9阴性的外泌体（Jurkat和几种B细胞淋巴瘤细胞）。通常检测CD9、CD81和CD63以验证我们的制剂中是否存在膜。同样重要的是需要确定来自细胞器的污染囊泡水平：ER：热休克蛋白90B1，钙内；高尔基：GM130；线粒体：细胞色素C；细胞核：组蛋白。外泌体分子组成因细胞来源而异。虽然这些单个分子类别的测量可用于估计外泌体丰度，但这些值不一定与外泌体浓度完全相关，也不存在跨EV源样本的普遍性；因此，不应将其作为的外泌...