10XGenomics和Drop-Seq具有类似的技术原理。从横向孔道中逐一输入凝胶微珠，一列纵向孔道输入细胞，凝胶微珠与细胞碰撞后会吸附在凝胶微珠上，并通过微流控技术，将之输入到第二纵向孔道，即油相孔道中。这时候，就形成了一个个油滴并输出并收集在EP管中。每一个油滴中会落入一个细胞以及一个凝胶微珠，那么在每一个凝胶微珠中上长满了不同的C...

关于10XGenomics单细胞平台的样本类型和样本制备：10X平台在上机前需要注意细胞消化后的细胞团块，获得分离良好的细胞悬液、无细胞随便、极少的细胞团块，且细胞活力高（＞70%）；此外，了解您所研究细胞的大小范围也很重要。细胞大小通常与细胞表达的转录本数量有关。各种尺寸不同的细胞（一般直径不大于50μm）均可与我们基因表达解决方案中使...

针对样本活性的问题，10×Genomics官方建议当单细胞悬液活性低于70%时应做去除死细胞操作，但也需要注意到，去除死细胞的操作会损失一定的细胞数量，10×Genomics和MiltenyiBiotec都没有给出单细胞悬液含有多少细胞数量才建议做去除死细胞的操作。基于烈冰多年单细胞测序实验经验，建议当细胞悬液进行质量和活性检测后，考虑对...

为什么需要单细胞分辨率？生物学就像宇宙一样。它非常复杂，有许多独特的单体，也就是细胞。这些细胞相互作用并扮演不同的角色，在更大的体系中构建并驱动多个过程。就像伽利略探索宇宙的努力一样，发现和定义这些细胞也需要高分辨率的工具，才能解开促成生物学复杂性的基因表达异质性。单细胞测序能够在以一个细胞为功能单位中开展生物学研究，阐明具体细节，构建出...

作为单细胞测序的一个重要里程碑，10xgenomic公司于2016年2月推出10xChromiumSingleCellGeneExpressionSolution，此平台整合了仪器、试剂盒和信息学软件，能精确对接illumina测序仪，因此可实现大量大细胞的快速高效标记、测序和分析，获得单细胞水平的基因表达谱和差异情况，并通过对复杂细胞群...

相对于Smart-Seq技术在细胞数量上的问题，BD平台普遍提供的细胞数量都在1000-10000不等的测序细胞量，特殊研究需求的项目，可提供上限40000个细胞的捕获量（单个样本）。这个量级的测序细胞量已经可以说能够完全覆盖绝大部分组织的Single Cell群体类型。因此，对于基于基因表达进行准确细胞分型上，无论是从细胞数量上来说还是...

单细胞获得困难，不同组织要求不尽相同难以搞定？烈冰2000+项目消化经验，100+组织类型解离protocol，精心设计不同组织实验的解离、细胞悬浮实验体系，确保单细胞的获得。冻存样本无法实验，珍贵样本无法使用？烈冰采用国际认可的冻存组织复苏技术以及死细胞过滤技术，确保冻存组织使用。珍贵样本，细胞数量太少，消化背景杂无法做单细胞？采用国际...

一味的追求高细胞数量的捕获，小心得不偿失，原因在这：单细胞测序所有的分析都是基于细胞聚类进行，而细胞聚类是在区分cell和non-cell后，获得细胞基因表达谱，通过降维（pca），无监督聚类以及可视化（t-SNE）得到的。进行细胞聚类时需要考虑到每个细胞的基因表达模式，因此即使是相同的数据，在剔除几个细胞的情况下，前后获得的聚类图也会出...

烈冰科技作为国内率先同时拥有10XGenomics和BDRhapsody双分选平台的测序服务商及云计算服务供应商，经过多年实战，拥有丰富的单细胞悬液制备和分选经验，实测BDRhapsody对能够高效捕获粒细胞。针对不同的分选平台、建库方法，实战总结搭建出不同的数据预处理工作流程；烈冰科技NovelBrain®生物大数据平台能有效支撑生命科...

样本制备后的保存为了尽可能地减少转录组的变化，在对细胞进行清洗和计数后，单细胞悬液应当保存于冰上，直至用于后续的上机和文库制备步骤。在理想状况下，一旦制备好样本，应当在3min钟内将其用于下游步骤。然而，您还有必要了解各类细胞的不同性质，因为这可能会影响细胞应在冰上保存的时间，以及它们在制备后多久便应当被尽快使用。例如，有些细胞（如PBM...

烈冰生信团队倾情研发的NovelBrain®生信大数据分析平台，针对庞大的单细胞测序数据，能够实现细胞类型鉴定的快、精、准：一键导入genelist构建个性化基因列表；轻松一点即可展示Marker基因的Featureplot；任意修改Cluster的颜色和名称助力高效鉴定细胞类型；一键获得t-SNE图、Heatmap和Violin图：轻松...

针对单细胞测序的细胞上样数，为什么不建议捕获到的细胞数量越高越好？一味地追求高数量的细胞捕获可能会存在一些问题。例如在上机细胞悬液浓度固定时，如果目标细胞捕获数增加到8000甚至10000，上样细胞悬液体积势必增加，在细胞悬液质量不是很理想（细胞活性5%、结团率均>5%）的情况下，引入的背景信号会增加，分析结果不理想的直接体现包括：cel...