胎牛血清制备：用止血钳夹住血管，切开1厘米左右的切口进行插管，插好管后打开血管的止血钳，让牛血顺采的血管流入另一个洁净房间内的瓶中。采的血瓶采的血前经干烤灭菌（180℃2小时）后，按无菌操作注入10毫升左右经高压灭菌的生理盐水后加塞封口，于采的血前半小时放入37℃恒温箱备用。采的血前先晃动瓶内生理盐水，使其充分湿润瓶壁后倒出，再进行采的血...

  Real-time PCR原理：所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。DNA结合染料法，应用一种带有荧光的、非特异的DNA结合染料检测PCR过程中积累的扩增产物。检测所有双链DNA扩增产物，包括非特异反应产物，如引物二聚体。可对任何...

  胎牛血清：胎牛血清用于细胞培养已经超过半个世纪了，20世纪50年代末TheodorePuck在细胞和组织培养中初次加入胎牛血清（FBS）来刺激细胞生长。后来人们发现，由于胎牛未进食过母乳，所以IgG的含量极低，不会阻碍细胞生长，而且胎牛血清中含有丰富的促进细胞生长的成分，如维生素、运输蛋白、微量元素、生长因子等，胎牛血清生产的一切环节均有...

  胎牛血清的生产工艺：胎牛血清适合脉冲示踪实验（同位素标记研究细胞代谢）适合转染CHO后的筛选，避免外源小分子对细胞产生干扰。透析胎牛血清是在胎牛血清的基础上进行加工的。胎牛血清在无菌条件下要经过0.1微米膜三重过滤，要进行一系列的检测，包括理化性质检查（如渗透压和pH值），成分检查（如内的毒性和血红蛋白）、外源因子检查（如细菌、病毒和支原...

  胎牛血清在细胞培养中的作用：1.提供对维持细胞指数生长的Hormone，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等，能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因...

  Real-time PCR原理：所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。DNA结合染料法，应用一种带有荧光的、非特异的DNA结合染料检测PCR过程中积累的扩增产物。检测所有双链DNA扩增产物，包括非特异反应产物，如引物二聚体。可对任何...

  Real-timePCR技术服务聚合酶链式反应的试验污染：实验室中克隆质粒的污染：在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室，这个问题也比较常见。因为克隆质粒在单位容积内含量相当高，另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂，而且在活细胞内的质粒，由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力。其污染可能性也很大。污染的监测：一个好的...

  聚合酶链式反应的试验污染：PCR反应的很大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人脑袋不适的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因：标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样污染导致标本间污染；有...

  膜片钳技术与其他生物检测技术的结合应用：1.膜片钳与光学显微成像技术结合应用：利用激光扫描共聚焦显微镜、双光子显微镜、荧光显微镜等技术可以对细胞进行实时成像研究，将膜片钳技术与光学显微成像技术结合使用不但可以检测细胞的电流变化情况，而且还可以对细胞的电信号传递活动进行成像观察。2.膜片钳与原子力显微镜结合应用：将膜片钳和AFM结合使用的技...

  膜片钳芯片技术是继细胞芯片之后的又一种崭新的分析细胞电生理参数的芯片技术.由于该芯片除了具有传统膜片钳的高分辨和高准确性特点外,还具有高通量、自动化以及细胞多通道参数和细胞网络参数在线和实时检测等优点.因此,该芯片技术将很大促进细胞离子通道、细胞网络传导以及药物筛选的研究和应用.文中具体介绍了膜片钳芯片技术的发展及其应用,结合作者的研究工...

  聚合酶链式反应的试验污染：PCR反应的很大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人脑袋不适的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因：标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样污染导致标本间污染；有...

  膜片钳技术之全细胞式与细胞吸附式的区别：全细胞式记录这个名字乍听上去好像和细胞吸附式没啥两样，无非就是把电极戳在细胞上然后记录它的电活动。但事实是，这两者存在天壤之别。首先的一大区别体现在外部构型上：在cell-attached的记录中，我们不需要用电极戳破细胞膜，只需将其怼在细胞膜上即可；但在whole-cell的记录中，我们不只要将电...