染色体当细胞从间期进入有丝分裂期,间期细胞微管网络解聚为游离的αβ-微管蛋白二聚体,再重组成纺锤体,介导染色体的运动;分裂末期纺锤体微管解聚,又重组形成细胞质微管网络。可分为:动粒微管:连接染色体动粒于两极的微管。极间微管:从两极发出,在纺锤体中部赤道区相互交错的微管。星体微管:中心体周围呈辐射分布的微管。染色体的运动依赖纺锤体微管的组装和去组装。在这一过程中动粒微管与动粒之间的滑动主要是依靠结合在动粒部位的驱动蛋白和动力蛋白沿微管的运动来完成。极微管在纺锤体中部交错,有些分布在极微管之间特殊的双极马达蛋白,其中2个马达蛋白沿一条微管运动,另2个马达结构域沿另一条微管运动。由于2条微管分别来自二极,故极性相反。当双极驱动蛋白四聚体沿微管向正极运动时,纺锤体二极间距离延长。反之纺锤体距离缩短。纺锤体微管的微妙调整,确保了遗传信息在细胞分裂中的准确无误传递。ICSI纺锤体卵细胞评价

纺锤体成像技术在细胞生物学领域具有很广的应用价值。以下是几个主要的应用方向:揭示纺锤体的精细结构和动态变化:纺锤体成像技术能够清晰地捕捉到纺锤体的精细结构和动态变化,如微管的排列、染色体的分离和纺锤体的形态变化等。这些观测结果不仅有助于揭示纺锤体的形成和功能机制,还为理解细胞分裂的复杂过程提供了新的视角。研究纺锤体相关疾病:纺锤体的异常与多种疾病的发生和发展密切相关,如遗传性疾病等。纺锤体成像技术能够实现对纺锤体结构和功能的精确观测,为揭示这些疾病的发病机制提供有力的支持。此外,该技术还可以用于评估药物对纺锤体的影响,为药物筛选提供新的思路和方法。辅助生殖技术:在临床诊疗中,纺锤体成像技术也被广泛应用于辅助生殖技术中。例如,在卵胞质内单精子注射(ICSI)过程中,纺锤体成像技术能够精确观测卵母细胞中纺锤体的位置,从而避免在精子时损伤纺锤体,提高受精率和临床妊娠率。纺锤体改善分级纺锤体微管的动态变化是细胞对外界刺激响应的一部分。

Oosight影像分析系统采用液晶偏光成像技术,无需对卵母细胞进行染色,即可实时、清晰、高对比度地进行纺锤体结构和透明带成像,对ICSI、核移植操作、卵母细胞质量评价等有很好的辅助作用。主要应用ICSI:在单精胞浆注射过程中定位初级卵母细胞,避免卵的破裂损伤,增强胚胎的发育潜能。卵评估:利用定量的分析数据对卵进行分级,改善对胚胎的选择。体外成熟评估:在未成熟卵催化(IVM)过程判断成熟期,判断依据采用的是准确的识别纺锤体,而非不准确的极体。质量控制:利用定量的分析数据对卵进行分级,改善对胚胎的选择。核移植:显著提高核移植的成功率。由于在核摘除的过程可以清楚的看到核质,使得核移植的成功率增加了80%,并减少了线粒体DNA的摘除。卵冷冻研究:对冷冻的初级卵母细胞进行解冻前和解冻后的定量分析,从而判断卵的发育力,改善妊娠率。纺锤体研究:检测胚胎中纺锤体的发育过程,确定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培养箱的显微镜)。可以对染色体非正常的或非整倍体的胚胎成像,从而选择***的前体做PGD诊断。透明带研究:测量卵母细胞的透明带;准确测量纺锤体和透明带中分子排列方向的差别变化,判断纺锤体和透明带是否处于正常状态
对卵子进行评估:胚胎学家指出:有纺锤体出现的卵母细胞有较高的受精率和胚胎发育率,也就是说纺锤体的存在与否,可以用来评价卵母细胞胞浆的成熟度。因此胚胎学家有三次通过纺锤体对我们的卵子进行评估的机会:(1)胚胎学家可以利用偏振光显微镜对卵子的纺锤体进行观察,通过定量分析数据对卵子进行分级,挑选出正常分裂的卵子,也就是出现纺锤体的卵子,进而提高试管婴儿的受精率。(2)胚胎学家还可以通过纺锤体来确定体外培养成熟卵子(IVM)的成熟期,进而为体外成熟卵子进行评估,***提高试管婴儿的受精率和胚胎发育率。(3)由于纺锤体对环境温度的改变非常敏感。温度降至25℃时,只需要10分钟的时间,就会纺锤体造成不可逆的损伤。所以冷冻复苏过程中温度改变很有可能对卵母细胞纺锤体和染色体造成损伤。因此胚胎学家可以应用纺锤体成像帮助选择复苏后具有正常纺锤体的卵母细胞,进而可以提高受精率、卵裂率和临床妊娠率。综上所述,通过***细胞的纺锤体成像技术可以避免辅助生殖技术对卵母细胞纺锤体的损伤,有助于选择具有正常纺锤体的卵母细胞,有利于提高受精率、卵裂率和临床妊娠率,利用更科学的方式,将让求子路的终点不再那么遥远。纺锤体微管的正极朝向细胞两极,负极则靠近染色体。

冷冻电镜技术(Cryo-EM)近年来在结构生物学领域取得了重大突破,也为纺锤体卵冷冻研究提供了新的视角。通过将生物样品冷冻至极低温并在电子显微镜下进行观察和成像,冷冻电镜能够揭示生物大分子的高分辨率结构,包括纺锤体微管等精细结构。这一技术不仅克服了传统电镜技术对样品制备的严格要求,还能够在接近生理状态下观察纺锤体的形态和功能,为无损观察纺锤体提供了强有力的技术支持。无损观察纺锤体技术能够实时监测冷冻过程中纺锤体的形态变化,从而准确评估冷冻保存的效果。通过对比冷冻前后纺锤体的形态和稳定性,研究者可以优化冷冻保护剂的配方和浓度,以及改进冷冻程序,减少冷冻损伤,提高解冻后卵母细胞的存活率和发育潜能。纺锤体的研究有助于揭示细胞分裂过程中的错误修复机制。香港偏光成像纺锤体提高冷冻保存效率
纺锤体在细胞分裂中的精确调控是生物体发育的基础。ICSI纺锤体卵细胞评价
纺锤体观测仪在补救ICSI中的应用我们知道,成熟的卵母细胞含有1个极体,也就是***极体。IVF加入精子后,精子会穿透层层障碍**终进入卵子,随着时间的推移,~6小时后卵子的纺锤体会将染色单体拉向两极,进而排出第二极体,再往后大约加精后9~16小时,雌雄原核会出现,而原核的出现才是受精的标志。但是对于那些没有受精的卵子,到了原核出现的时间窗发现没有受精时再去补救ICSI,往往错过了卵子的比较好受精时间,因为没有受精的卵子会在体外老化,即使受精,胚胎的发育潜能也很低。所以,我们在加精后的4~6小时,通过观察第二极体的排出来初步判断是否受精,**的增加了那些受精障碍患者的受精率,也避免了卵子的老化。当然,偶尔也会出现错误补救。文献报道对IVF受精后的未排出第二极体的卵母细胞进行补救,实验组用纺锤体观测仪观察并统计纺锤体的数目,82.7%含有一个纺锤体,17.3%含有两个纺锤体,并对含有一个纺锤体的卵母细胞进行补救ICSI;而对照组并未用纺锤体观测仪观察纺锤体,只对未排出第二极体的卵母细胞进行补救ICSI。结果发现使用纺锤体观测仪观察纺锤体的数目能显著提高正常受精率,降低多原核受精比率。ICSI纺锤体卵细胞评价
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