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免疫沉淀基本参数
  • 品牌
  • 世途科生物
  • 产品名称
  • 免疫沉淀磁珠Protein A/G
  • 有效期
  • 12个月
免疫沉淀企业商机

“免疫沉淀”一般是指采用固定在固相支持物上的结合蛋白,进行小规模的蛋白质亲和纯化的实验。更确切地说,IP是采用固定在微珠支持物(一般是琼脂糖树脂)上的特定抗体,从复杂的混合物中,纯化单一抗原的实验。固定化蛋白质复合物的组装既可以分步进行,也可以一步完成。

常见的加样顺序:抗体和样本(如细胞裂解物)一起孵育,然后加入亲和微珠,用于捕获抗体-抗原复合物。也可以将抗体和微珠(通过抗体结合蛋白,如蛋白A、G或A/G等,直接或间接结合抗体)先进行孵育,然后再加入含有抗原的样本。当抗原、抗体和固相支持物产生结合以后,充分洗涤微珠,再采用适当的洗脱缓冲液从支持物上洗脱抗原。
免疫沉淀技术ChIP的应用有哪些?上海anti DYKDDDDK免疫沉淀选磁珠还是琼脂糖珠

ChIP实验的基本步骤包括:
1. 交联(Crosslinking):细胞被甲醛等交联剂处理,使得蛋白质和DNA之间的相互作用被固定,形成稳定的蛋白质-DNA复合物。
2. 细胞裂解:裂解细胞,释放染色质,同时保持蛋白质-DNA复合物的完整性。
3. 超声或酶解:通过超声或酶解将染色质切割成较小的片段,以便于后续步骤中的免疫沉淀。
4. 免疫沉淀(Immunoprecipitation):加入针对特定组蛋白修饰或转录因子的抗体,这些抗体会特异性地结合到目标蛋白质上。
5. 捕获复合物:使用蛋白A或蛋白G结合的珠子捕获抗体-蛋白质-DNA复合物。
6. 洗涤:洗涤珠子以去除未特异性结合的蛋白质和DNA片段。
7. 逆转录交联:将捕获的复合物从珠子上洗脱,并进行逆转录交联,使固定的蛋白质-DNA复合物分离。
8. DNA纯化:纯化从免疫沉淀中得到的DNA片段。
9. 分析:通过qPCR、芯片分析(ChIP-chip)或高通量测序(ChIP-seq)等方法分析沉淀的DNA片段,以确定特定蛋白质在基因组上的结合位点。
蛋白免疫沉淀磁珠原理免疫沉淀样本的制备。

ChIP技术的应用:
1. 转录因子结合位点的鉴定:研究特定转录因子在基因组上的结合模式。
2. 组蛋白修饰的分布:分析不同组蛋白修饰在基因组上的分布情况,这些修饰与基因的活跃或沉默有关。
3. DNA甲基化研究:结合ChIP技术可以研究DNA甲基化对基因表达的影响。
4. 染色质结构和功能:研究染色质重塑对基因表达和细胞功能的影响。
5. 疾病相关基因的调控:研究疾病状态下基因调控网络的变化。
ChIP技术是表观遗传学研究中的一个重要工具,它可以帮助科学家们理解基因表达是如何在分子水平上被精确调控的。

免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP)是一种用于研究蛋白质相互作用、蛋白质复合物组成以及特定蛋白质的表达和纯化的实验技术。
基本原理
免疫沉淀技术基于抗体与特定蛋白质(抗原)之间的特异性相互作用。通过使用针对目标蛋白质的特异性抗体,可以从含有多种蛋白质的复杂样本中捕获并富集目标蛋白质。
免疫沉淀技术有多种类型,包括:
1. 个别免疫沉淀法(Individual IP)
2. 免疫共沉淀法(Co-IP)
3. 染色质免疫沉淀法(ChIP)
4. RNA免疫沉淀法(RIP)
近年来,免疫沉淀技术在固相支持物的选择上有了很大进步。磁性微珠因其操作简便、快速和自动化程度高而逐渐取代了传统的琼脂糖树脂。
免疫沉淀选琼脂糖珠还是磁珠?

免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP)是一种用于研究蛋白质相互作用和纯化特定蛋白质的实验方法。
优点:
1. 特异性强:利用特异性抗体捕获目标蛋白,可以有效地从复杂的生物样本中分离出感兴趣的蛋白质。
2. 灵敏度高:可以检测到低丰度的蛋白质,包括瞬态或弱相互作用的蛋白质复合物。
3. 应用范围广:适用于多种生物样本,如细胞裂解物、组织提取物和生物流体。
4. 生物学洞察深入:能够揭示蛋白质之间的相互作用网络,有助于理解细胞内的信号传递和调控机制。
5. 可与其他技术联用:如与质谱(IP-MS)联用,可以准确鉴定蛋白质及其相互作用伙伴。
缺点:
1. 对抗体依赖性高:需要高亲和力和高特异性的抗体,抗体的质量直接影响实验结果。
2. 可能存在非特异性结合:样本中的其他蛋白质可能与抗体或固相支持物发生非特异性结合,导致背景噪音。
3. 可能影响蛋白质的天然状态:裂解和沉淀过程可能会改变蛋白质的构象和功能。
4. 实验重复性:需要多次实验来确保结果的可重复性和可靠性。
5. 样品处理:需要避免样品降解和非特异性结合,这可能需要使用蛋白酶抑制剂和适当的缓冲液条件。
免疫沉淀技术RIP的优缺点是什么?苏州Co IP免疫沉淀磁珠多少钱

免疫沉淀Co-IP技术选琼脂糖珠还是磁珠?上海anti DYKDDDDK免疫沉淀选磁珠还是琼脂糖珠

免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP)在生物医学研究中有着广泛的应用,以下是一些主要的应用领域:
1. 蛋白质相互作用研究:IP技术可以用来研究蛋白质之间的相互作用,揭示蛋白质复合物的组成和蛋白质之间的相互作用网络。
2. 信号转导研究:通过IP技术,可以富集信号转导通路中的关键蛋白质,研究信号转导的机制和调控[。
3. 蛋白质修饰研究:IP技术可以用于富集经过特定修饰的蛋白质,例如磷酸化、乙酰化等,进而研究蛋白质修饰的功能和调控。
4. 药物靶点筛选:IP技术可以用于富集药物靶点蛋白质,帮助筛选潜在的药物靶点。
5. 疾病机制研究:通过分析疾病相关蛋白质的相互作用,IP技术有助于揭示疾病的分子机制,为理解疾病的发展过程和寻找靶点提供重要信息。
6. 药物相互作用分析:IP技术可以用于分析药物与蛋白质的相互作用,为药物作用机制研究提供重要信息。
7. 生物标志物发现:IP技术可以用于鉴定与疾病状态相关的蛋白质相互作用,筛选出潜在的生物标志物,用于疾病的诊断和预后评估。
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