如何判断是否是基质效应呢?第一种方法是采用线性稀释,一般来讲,抗原和捕获抗体、检测抗体之间的结合作用很强,样品浓度被稀释并不影响它们的结合,而造成基质效应的非特异结合的力要弱很多,如果不断稀释样品,非特异结合造成的干扰会逐步减少,测量值也更接近真实值。没有基质效应时,无论如何稀释,测量值都和真实值吻合。而有基质效应时,稀释会造成非特异性结合比例的减少,测量值也相应地产生很大改变。第二种方法是掺入回收率实验,将低、中和高浓度的分析物掺入到已测定过浓度的样本中,掺入前后实测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,回收率以百分比的形式呈现。回收率介于80-120%,才符合标准。检测试剂盒在检测试剂盒中一般有3次加样步聚。停影液
检测试剂盒标本保存方法:标本管中增加物质的影响。抗凝剂、酶抑制剂及快速分别血清的分别胶等均对测定有必定烦扰作用。标本溶血。由于各种人为原因引起的标本溶血,均可因红细胞破坏溶解时释放出很多具有过氧化物酶活性的血红蛋白,在以辣根过氧化物酶为符号的测定中,会导致非特异性显色,检测试剂盒烦扰测定作用。为打败上述烦扰作用,标本搜集时有必要留意避免溶血。标本保存不妥。 在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚组成多聚体、AFP可构成二聚体,在间接法测定中会导致本底过深、乃至形成假阳性;标本放置时刻过长(如一日以上),有时抗原或抗体免疫活性削弱,亦可出现假阴性。为打败上述烦扰,测定的血清标本宜为新鲜搜集;如不能立即测定,5天内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质部分浓缩,分布不均,应充沛混合后再测定,但混匀时应轻柔,不行激烈振荡。停影液pH缓冲溶液有何用途:pH测量前标定校准pH计。
标准物质应在规定的贮存或使用条件下,定期地进行待定特性量值的稳定性检验。稳定性检验的时间间隔可以按先密后疏的原则安排。在有效期间内应有多个时间间隔的监测数据。当标准物质有多个待定特性量值时,应选择那些易变的和有代表性的特性量值进行稳定性检验。选择不低于定值方法精密度和具有足够灵敏度的测量方法进行稳定性检验,并注意操作及实验条件的一致。考察稳定性所用样品应从分装成小包装单元的样品中随机抽取,抽取的样品数对于总体样品有足够的代表性。
试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一,但不能反映试剂质量的全部。试剂成份、纯度、用量及稳定性,才是保证试剂质量的关键所在。目前市售的一些试剂具有抗干扰作用,主要是通过加入抗干扰物质或使用新的色素原以避免内源性物质的干扰。但值得注意的是:一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时,会带来样品含量真实性的变化。 线性范围变窄 现象:高值测不高。原因:生产试剂时有效成分投料量不足;试剂成份稳定性较差。灵敏度变低现象:酶促反应速度曲线斜率下降,测定结果有严重系统误差。原因:试剂底物浓度不足。检测试剂盒是经过酶联免疫吸附反响进行实验来检测特定物质的检测试剂盒。
检测试剂盒用途:运用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是我国型HEV毒株主要氨基酸序列中抗原性很强的肽段,别离来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品参与孔中并孵育,如果其间存在HEV IgM抗体,这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除掉其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后参与羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与*次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除掉未结合的酶结合物,参与TMB底物溶液,在第三次孵育时会发作酶-底物反响,只要那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所构成的复合物的孔才会发作颜色改变,参与硫酸溶液停止酶和底物间的反响,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体检测试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大。猪全血
磷酸缓冲盐溶液具有盐平衡。停影液
液体固体试剂正确取用试剂的方法过程:取用试剂后应立即盖上原来的瓶塞,把试剂瓶放回原处,并使试剂标签朝外,应根据所需用量取用试剂,不必多取,如不慎取出了过多的试剂,只能弃去,不得倒回或放回原瓶。以免沾污试剂。 从滴瓶中取用少量试剂。瓶上装有滴管的试剂瓶称作滴瓶。滴管上部装有橡皮头,下部为细长的管子。使用时,提起滴管,使管口离开液面,用手指紧捏滴管上部的橡皮头医学|教育网搜集整理,以赶出滴管中的空气,然后把滴管,伸入试剂瓶中,放开手指,吸入试剂。再提起滴管将试剂滴入试管或烧杯中。停影液