检测试剂盒实验经验分析:吸取液体时,要用量程和需要量接近的去吸,减少误差。将液体加到酶标孔中时,避免头和孔内液体接触,可使头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去(应该是加样的时候,板上稀释不算的吧)。液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能(注意是平行晃动,即上下or左右)。温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发(老办法是放入湿盒内,纱布加点无菌水即可)。当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。Triton-NH4OH细胞裂解液
液体培养基接种向肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时,其操作步骤基本与斜面接种时相同,不同之处是挑取菌体的接种环放入液体培养基后,应在液体表面处的管内壁上轻轻磨擦,使菌体从环上脱落,混进液体培养基,塞好试管塞后,摇动液体,使菌体在液体中分布均匀,或用试管振荡器混匀。向液体培养基中接种量大或要求定量接种时,可将无菌水或液体培养基注入菌种试管,用接种环将菌苔刮下,再将菌种悬液以无菌吸管定量吸出加入,或直接倒入液体培养基。如果菌种为液体培养物,则可用无菌吸管定量吸出加入或直接倒入液体培养基。整个接种过程都要求无菌操作。改良贝林(Balling)固定液BMC原代分离步骤:取淋巴细胞分离液5mL于15mL灭菌离心管中待用。
PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称,不只伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在适条件下参与生物反应,所以使用PBS是。PBS也不是的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持的条件保证生物活性物质保持其完整的特性。
检测试剂盒操作注意事项:实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。所有液体组分使用前充分摇匀。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀检测试剂盒里的各种成份及样品。利福平溶液怎么配制:配制时每毫升可加入~5滴 10 N NaOH以助溶。
pH缓冲溶液有何用途:(1)pH测量前标定校准pH计。(2)用以检定pH计的准确性,例如,用pH=6.86和pH=14.00,标定pH计后,将pH电极插入pH=9.18溶液中,检查仪器显示值和标准溶液的pH值是否一致。(3)在一般精度测量时检pH计是否需要重新标定。pH计标定并使用后也许会产生漂移或变化,因此在测试前将电极插入与被测溶液比较接近的标准缓冲液中,根据误差大小确定是否需要重新标定。(4)检测pH电极的性能。如何配制pH标准缓冲溶液:对于一般pH测量,可使用成套的pH组冲试剂(可配制250mL),配制溶液时,应使用去离子水,并预先煮沸15~30分钟,以除去溶解的二氧化碳。剪开塑料袋将试剂倒入烧杯中,用适量去离子水使之溶解,并冲洗包装袋,再倒入250mL容量瓶中,稀释至刻度,充分摇匀即可。磷酸缓冲盐溶液可调整的适宜pH缓冲作用。Walpole乙酸缓冲液(0.2mol/L,pH2.696-6.518)
杀灭曲线的建立:按照每2天进行活细胞计数,来确定杀灭未转染细胞的恰当浓度。Triton-NH4OH细胞裂解液
检测试剂盒安全性:试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀检测试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。Triton-NH4OH细胞裂解液
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