潮霉素 B(Hygromycin B) 是一种由吸水链霉菌产生的,能够克制细菌、菌类和 一些高等真核生物细胞内的蛋白质生物合成来。潮霉素 B 属于是氨基糖苷类,通过 克制蛋白质的合成来阻止微生物生长,对原核细胞与真核细胞都是克制作用。 Leagene Hygromycin B solution 常用于转基因实验的抗性筛选,筛选具有潮霉素 B 的抗性基因。 产品组成: 编号 名称 CA0012 CA0012 Storage Hygromycin B solution (50mg/ml) 使用说明书 10ml 20ml 1份 4℃ 避光 操作步骤(光供参考): 1、 根据实验具体要求操作。 2、 一般植物细胞筛选浓度在 20~200μ g/ml,动物细胞筛选浓度 50~1000μ g/ml,应根 据具体实验选择较佳筛选浓度。PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂。Ficoll 400裂解液(20% w/v)
氨苄青霉素为白色晶体或粉末,分子式是C16H19N3O4S,分子量为349.41。溶于稀酸和稀碱,微溶于水和甲醇,几乎不溶于氯仿、96%乙醇、、乙酸乙酯和固定油。无臭,味苦。抗革兰氏阳性及阴性菌,用于分子生物学和组织培养(防止微生物污染和抗性筛选)。氨苄青霉素时常被用于分子生物学上,作为细菌(如大肠杆菌)吸收基因(如质粒)的测试。测试会将一组基因,连同已编码抗氨苄青霉素的基因插入细菌中。该细菌会被放于充满氨苄青霉素的环境下培育,直至成功制造卞所需的基因。淀粉水解试验试剂用pH计测定配制好的盐溶液的pH值,使其在6.4~7.0之间。
杀灭曲线的建立:通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线),确定能够杀死未转染宿主细胞的较低浓度,从而筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株。建立杀灭曲线至少选择5个浓度。1、按照20-25%的细胞密度将未转化的细胞铺在合适的培养板上,37℃,CO2过夜培养(需要更高密度,可增加接种量)。2、根据细胞类型,设定合适的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。3、第2天换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基,每个浓度做三个平行孔。4、接下来每3-4天更换新的含药物培养基。5、按照每2天进行活细胞计数,来确定杀灭未转染细胞的恰当浓度。通常7-10天内能够杀死绝大多数细胞的较低浓度为筛选用的工作浓度。
用亚甲基蓝溶液染色后,被染为深蓝色的部分是(细胞核)亚甲基蓝可以结合核酸,使细胞核呈蓝色。 台盼蓝能使死细胞着色机理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中较常用的死细胞鉴定染色方法之一。PH电极的保护液是为了保持其原有的ph电势平衡不变。
检测试剂盒检测原理:检测试剂盒为双抗体夹心法检测抗原RBD蛋白,酶标板采用高亲和力抗RBD蛋白抗体作为包被物,检测时酶标板孔加入待检样品或标准品(哺乳动物重组表达RBD蛋白),再加入生物素化抗RBD蛋白抗体,反应后加入链霉亲和素HRP,后加入单组份TMB底物液。 如果待检样品中含有RBD蛋白,TMB底物液在HRP催化下显色,加入终止液终止显色后,在酶标仪OD450/OD630读取吸光值,吸光值大小与待检测样品中RBD蛋白浓度呈正相关,根据标准品浓度/吸光值绘制的标准曲线,可计算出待检样品中RBD蛋白含量。配制ph计的3mol/L的KCL溶液 ph计的ph电极在使用前都是被护套里的保护液保护着。Ficoll 400裂解液(20% w/v)
浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。Ficoll 400裂解液(20% w/v)
近年来,全球各个地区特别是工业发达地区都把发展精细化学品作为传统化工产业结构升级调整的重点发展战略之一, 其化工产业均向着“多元化”及“精细化”的方向发展。精细化学品主要应用于农业、建筑业、纺织业、医药业、电子设备等行业。随着下游各行业的进一步发展,对生化试剂透析袋,标准品,液体试剂,抑制剂的需求数量上升,性能要求进一步提高,精细化工行业与下游的行业之间的关系变得更加紧密。国际上精细化学品已有40-50个门类,10万多个品种。精细化学品应用于日常生活的方方面面,如医药、染料、农药、涂料、日化用品、电子材料、造纸化学品、油墨、食品添加剂、饲料添加剂、水处理等,还在航空航天、信息技术、新材料、新能源技术、环保等高新技术方面普遍应用。随着国内经济飞速发展、生产技术的进步、国内市场需求的飞速增长、原料和资本供应状况的改善、全球化专业分工以及发达地区由于生产成本和市场饱和等原因而采取战略转移和重组等策略,我国许可项目:危险化学品经营。(依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动,具体经营项目以相关部门批准文件或许可证件为准) 一般项目:生物科技领域内的技术开发、技术服务,植物提取物领域内的技术研究、技术服务、技术转让,批发实验设备及耗材、仪器仪表、化工原料及产品、电子产品、塑料制品、金属制品,从事各类生化试剂(不含危险化学品、易制毒化学品、监控化学品)的研发、分装及销售,货物或技术进出口(国家禁止或涉及行政审批的货物和技术进出口除外)。(除依法须经批准的项目外,凭营业执照依法自主开展经营活动)行业遇到了前所未有的发展机遇。Ficoll 400裂解液(20% w/v)
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