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EdU细胞增殖检测试剂盒基本参数
  • 品牌
  • 东寰生物
  • 型号
  • C01503
  • 产地
  • 上海
  • 是否定制
EdU细胞增殖检测试剂盒企业商机

    按照以下的表格进行染色反应液的配制:染色反应液组分500μl1ml2ml5ml1×反应缓冲液430μl860μlmlml催化剂溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA红色荧光溶液μlμl5μlμl缓冲添加剂50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30分钟;4、弃染色反应液,加入100μlTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次,每次10分钟;5、弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次5分钟。DNA染色1、将Hoechst33342用RNase-free水溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5μg/ml的1×Hoechst染色液;2、每孔加入100μl1×Hoechst染色液,室温避光孵育20-30分钟后,弃染色液;3、每孔加入100μlPBS洗细胞两次,去掉洗液。图像获取及分析建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。上海东寰告诉您如何正确使用EdU细胞增殖检测试剂盒?江苏品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒说明书

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EdU细胞增殖检测试剂盒BeyoClick™EdU细胞增殖检测试剂盒(DAB法)(BeyoClick™EdUCellProliferationKitwithDAB),是一种基于DNA合成过程中胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidine)类似物EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)的掺入,并通过随后的点击反应(Clickreaction)使EdU被生物素(Biotin)所标记,然后加入的辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(HRP-Streptavidin)与生物素结合,再然后通过DAB显色,从而实现简单、快速、高灵敏地检测细胞增殖的试剂盒。河南如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒说明书上海哪家EdU细胞增殖检测试剂盒厂家值得信赖?

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    免疫荧光技术服务免疫荧光技术服务(DH0014)一、服务介绍免疫荧光技术(Immunofluorescencetechnique)又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展*早的一种。将抗原或抗体用荧光素进行标记,标记的抗原或标记的抗体与相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光素,这种免疫技术称为免疫荧光素技术。免疫荧光细胞化学分直接法、夹心法、间接法和补体法。二、服务内容及价格服务编号服务内容服务价格服务周期(工作日)DH0014-01免疫荧光单标记检测咨询咨询DH0014-02免疫荧光双标记检测咨询咨询三、客户提供1、细胞株或细胞爬片。注:细胞爬片不宜太密;2、荧光检测所用的抗体3、实验前,客户需告知具体的细胞处理方式及详细要求。注:若有特殊处理的样品,请尽可能出示相关材料(具有保密性的材料除外)。四、服务流程免疫荧光单标记方法免疫荧光单标记是指只标记一种蛋白质分子,方法比较简单,只要按照染色步骤去做,通常不存在太多的问题。但要注意固定液的选择,固定液选择的合适与否,可能会直接影响染色结果。具体染色方法如下。1、所需材料与试剂a,培养在盖玻片或玻璃培养皿中融合程度达到60%-70%的细胞。b,一抗、FITC或TRITC标记的二抗。c。

    荧光试剂请避光保存。反应缓冲液10X1ml催化剂溶液25x400ulTAMRA红色荧光溶液400x25ul缓冲添加剂粉末200mgHoechstX20ul使用前须知该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。实验步骤(以24孔板,HK2贴壁细胞为例)EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。EdU细胞增殖检测试剂盒的原理是什么?上海东寰告诉您。

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EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。AdrianSalic特别强调:“与传统的免疫荧光染色不同,EdU反应能在几分钟内完成,且不需要进行严格的样品变性处理,使得组织成像更简单易行。”细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo?荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA,简单,快速,准确。这种检测方法非常快速,且只需简单的几个步骤,因此也适用于高通量筛选试验,如在药物筛选中检测加药后细胞的活力上海东寰告诉您什么是EdU细胞增殖检测试剂盒?河南品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒公司

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但该方法由于有放射性污染并且很难实现单细胞检测而受到很大的限制,随后逐渐被基于抗体检测的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步骤繁多,且需要使用BrdU抗体,影响因素较多,稳定性比较差。并且由于BrdU法需要使用抗体,有时会和其它目的蛋白基于抗体的检测相互产生干扰。EdU法基于EdU掺入和后续的点击反应,无需使用抗体、操作便捷、检测灵敏度高,是一种在BrdU法基础上升级换代的新方法,将会逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi™化学发光法(C0065、C0068)都是基于细胞活性的细胞增殖检测方法,能检测到细胞的总体增殖效果,但无法检测到单个的增殖细胞。江苏品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒说明书

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