通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留。EdU细胞增殖检测试剂盒的功能具体介绍。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价
以及酶或荧光偶联二抗，检测单细胞水平的DNA合成（BrdUbased）。前者通过免疫荧光检测，后者通过荧光显微镜检测。优点是：使用核酸酶变性DNA，在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。体内外均可进行标记，且可同时使用其他标记进行检测，操作安全简便。适用于贴壁或悬浮细胞，冰冻或福尔马林包埋组织切片。EdU与BrdU检测法不同，EdU-Click检测，如EdU-Click594（BCK-EDU594）无需进行DNA变性来检测掺入的EdU，而是通过一次快速、高度特异性的点击反应，将EdU高效地掺入到新合成的DNA之中,通过EdU与不同荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性，从而确地反映细胞的增殖情况。这一类细胞增殖用荧光标记采用温和的点击实验方案，准确且兼容各种抗体实验方案，整个实验可在30分钟内完成，在结果的数据丰富程度方面，堪比多重分析方法。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价上海东寰EdU细胞增殖检测试剂盒的运用领域。
建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察；如果条件限制，请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片，可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散，无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性
EdU细胞增殖检测和BrdU细胞增殖检测的对比。小分子化合物AndyFluor™azide与EdU之间的点击化学(ClickChemistry)反应不需要DNA变性，就可以进行高效快速的细胞增殖检测分析，该反应不受双链DNA中碱基对的影响，因此客户了BrdU掺入法的弊端。图2.使用EdU细胞增殖检测试剂盒对细胞和组织的染色效果。使用10μMEdU处理A549细胞2小时，然后分别使用AndyFluor™488azide(绿色,上图)、AndyFluor™594azide(红色,中间图)检测细胞增殖活性，使用DAPI进行复染（蓝色）。腹腔注射EdU到小鼠体内（每公斤小鼠注射5mgEdU），分别于0、12、24小时之后取小鼠肠组织，制成切片用AndyFluor™488azide(绿色,**下图)检测细胞的增殖情况，使用DAPI进行复染（蓝色）。使用EdU细胞增殖检测试剂盒能给人们带来便利吗？
EdU与T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒对如今市场的影响。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价
上海东寰告诉您使用EdU细胞增殖检测试剂盒的便捷性。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价
通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒评价
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