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EdU细胞增殖检测试剂盒基本参数
  • 品牌
  • 东寰生物
  • 型号
  • C01503
  • 产地
  • 上海
  • 是否定制
EdU细胞增殖检测试剂盒企业商机

EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象上海东寰EdU细胞增殖检测试剂盒的运用领域。上海咨询EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。福建哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒原理EdU细胞增殖检测试剂盒的基本结构级应用。

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通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。

传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性,抗原修复,抗原抗体过夜孵育,操作步骤复杂繁琐。并且由于BrdU抗体分子较大,嵌入DNA分子中的BrdU无法直接与BrdU抗体结合,必须先进行DNA变性操作才能使BrdU抗原表位暴露,但变性的程度可能导致错误结果。如果变性不充分,会导致BrdU难以暴露,无法检测,而且变性过程从边缘向中间渗透,会导致细胞核DNA的变性不均匀,边缘模糊不清。如果变性过分,则会导致DNA断裂,甚至降解,导致核染不均一。另外,不同抗体试剂公司的抗体质量不一致,造成难以确保实验重复性,且容易产生假阳性结果。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒如何去使用呢?

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细胞增殖虽然与多种因素有关,比如细胞代谢活性、与细胞增殖相关的蛋白表达、ATP的浓度等等,但是检测细胞增殖现象的直接准确的方法就是用荧光探针直接检测遗传物质DNA的合成,这种方法是研究细胞增殖、信号通路、DNA修复及分化等等方向常用的方法。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度上海EdU细胞增殖检测试剂盒的价格是多少?福建哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒原理

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EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction),其反应原理参见图1。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针。上海咨询EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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