在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。关于HEPES缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES+NaOH，另一种是HEPES+盐。GMP条件下生产艾伟拓注射级HEPES。贵州有登记号HEPES实验室采购
储存方法：HEPES缓冲液在2-8℃下可保存1年。注意事项：HEPES缓冲液运输时需要加冰袋。但储存时避免冷冻，否则会有盐类物质析出。N-三(羟甲基)甲基甘氨酸Tricine，CAS是5704-04-1，是一种两性离子缓冲液，名字由Tris和glycine衍生而来，结构类似于Tris，但是高浓度具有比Tris更弱的抑制性，也是“Good”缓冲液之一，**初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8，pKa=8.1（25℃），常用做电泳缓冲液，以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性，非常适用于电泳分离1~100kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中，比较10种常见的缓冲液，Tricine（25mM）表现出比较好的检测效果。另外，在自由基诱导的膜损伤实验中，Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。作者：泰安格林化工链接：湖南辅料HEPES实验室采购GMP条件下生产AVT注射级HEPES。
外源基因导入真核细胞的方法有很多种，如磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖转染法、脂质体法、电穿孔法、显微注射法等。2×HEPES缓冲盐溶液主要用于磷酸钙转染，其主要成分为HEPES，HEPES是一种非离子两性缓冲剂，能有效控制pH在范围，尤其在pH具有较好的缓冲能力，终浓度一般为mmol/L，培养液内含mmol/LHEPES 即可达到较好的缓冲能力。Leagene HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS)是一种常用的细胞转染溶液，主要由HEPES、氯化钠、磷酸盐等组成，其**适pH值为，经过滤除菌处理。影响磷酸钙转染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在细胞上停留的时间、休克时间。Leagene 2xHeBS要求DNA浓度在为宜，Hela、BALB等细胞沉淀放置，CHO、DUKX、BⅡ等细胞可以通过甘油、DMSO进行热休克处理以提高转染效率。
生物缓冲剂在生物实验中会经常被用到，它们种类繁多，可能你需要的缓冲剂和你选的缓冲剂表面符合，实际使用时就存在一定的差异，所以选好合适的缓冲剂是很有必要的；同时，不同缓冲液差别也很大。湖北新德晟带你来聊聊Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的之间的区别。Tris-HCl缓冲液Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较***的一种缓冲剂，其本身为弱碱，常用有效pH在“中性”范围，Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0。Tris-HCl缓冲液优点1、Tris-HCl缓冲液稳定，与生理体液的相容性好（Tris-HCl与钙、镁离子不会形成沉淀；相反，磷酸盐与钙、镁离子会产生沉淀）；2、而且相同PH，相同浓度的Tris-HCl缓冲液的离子强度低，这对酶类测定尤为重要，因为大离子强度易致有些酶失活。因此，有时用Tris-HCl代替磷酸盐缓冲液，效果更好。AVT稳定供货注射级HEPES。
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国内AVT注射用HEPES的cas号是什么？贵州有登记号HEPES实验室采购
(1)hepes缓冲液可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10mmol/L.(2)亦可配成100x贮存液（lmol/L），使用前取99ml培养液加入lml贮存液，**终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L（100x）hepes缓冲液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.作者：知乎用户0mmkBe贵州有登记号HEPES实验室采购
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