Tris-HCl缓冲液缺点：1、温度效应大，如4℃时pH=8.4，37℃时pH=7.42、pH值受溶液浓度影响较大，稀释十倍，pH值的变化大于0.1；3、对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。4、易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封。HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液，其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力，常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。HEPES缓冲液优点：pKa值介于6.0和8.0之间；在水中具有高溶解度；具有膜不透性，不易穿透生物膜；对生化反应影响有限，可耐化学和酶解作用，且不与金属离子生成复合物或沉淀；有极低的可见光和紫外光吸收；离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;HEPES缓冲液缺点：如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时，会产生细胞毒性的H2O2；HEPES水溶液必须远离光线以免影响实验结果；而配置成溶剂后，要在4℃下保存，建议在短期内使用效果更佳；HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内，不能直接长时间照射阳光。AVT注射用HEPES已登记！安徽药用HEPES使用注意事项
在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。广东大批量HEPES生产厂家GMP条件下生产注射级HEPES！
HEPES缓冲溶液的制备方法：一.500ml1MHEPES，pH=7.0Stocksolution的制备将19.15ghepes溶解在400ml蒸馏水中，加入0.5~1M的NaOH水溶液，调整至至少所需的pH(HePeS的有效ph范围为6.8~8.2)，然后用蒸馏水定容至500ml，在4保存。二.加入少量盐的HEPESBuffer***(500ml)用HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、0.5MNaOH水溶液调节pH，*后定容。.2HEPES缓冲盐溶液的制备将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml蒸馏水中，用0.5MNaOH调节至所需的pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。
这是维基百科对于生物缓冲液的定义和解释，在这里我们不做过多解释。生物缓冲液有很多种，这里我们只讲常见的几种，从它们的化学性质，注意事项，具体用途到**重要的，如何确定哪种缓冲液**适合你的实验。三羟甲基氨基甲烷Tris，CAS是77-86-1，它是应用*****的缓冲液，其溶液呈弱碱性，25℃下的pKa为8.06，pH缓冲范围：7.0-9.0，广泛应用于生物化学、分子生物学、涂料等领域。储存方法：Tris缓冲液容易吸收空气中的二氧化碳，储存时需要密封。三羟甲基氨基甲烷盐酸Tris-HCl，CAS是1185-53-1，是Tris的盐酸盐形式，其溶液呈酸性。艾伟拓稳定供货注射级HEPES！
HEPESBuffer(1M,7.5pH)PreparationandRecipeHEPESbufferisoneoftheGood'szwitterionicbufferwithapHrangeof6.8-8.2.ItiscommonlyusedincellculturemediumasitspHiswellmaintainedwithchangesincarbondioxideconcentration.ToprepareLofHEPESBuffer(1M,7.5pH):ChangethevalueinthetextboxabovetoscaletherecipevolumeTable1.RequiredcomponentsComponentAmountConcentrationHEPES(mw:238.30g/mol)238.3g1MPrepare800mLofdH2Oinasuitablecontainer.Add238.3gofHEPEStothesolution.AdjustsolutiontodesiredpHby10NNaOH.AdddH2Ountilvolumeis1L.于4摄氏度保存。艾伟拓注射用HEPES已登记？广东药用辅料HEPES
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