自动细胞计数确保结果的再现性
图四::为了验证fluidlab R-300细胞计数器的可重复性,在10天内测量多个样品,每天两次(上午和下午),每次两次重复。对于每个细胞系(HeLa, PBMCs和酵母),测试了三种不同的浓度。实心符号表示流体实验室R-300在同(N=4)重复的平均值。误差线表示标准差。竞品结果用虚线表示。
表1:3种不同细胞类型在3种不同标称浓度下10天的批间变异情况总结(上午和下午重复测量,N=40),每个样品均使用fluidlab R-300和竞品进行自动细胞计数。fluidlab R-300相对较低的变化系数(CV)表明,在所有测试的细胞类型和浓度中,细胞计数结果可重复是非常好的。 fluidlab R-300细胞计数仪找上海怡赛。湖北专注fluidlabR-300便携式细胞计数仪品牌排行
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论述
来自异源系统(如大肠杆菌)的蛋白质表达是许多研究领域的重要工具。在这里,我们阐述了fluidlabR-300对于P450酶表达质量评估是如何完成的。使用该工具和标准化学物质可以评估到所产生的酶的纯度和血红素掺入程度只有23%。我们可以得出结论,三组数据极为接近。首先,所表达的P450氧化还原酶*为Bradford试验测定的肽总库的一小部分,该部分可以使用SDS-PAGE或甚至质谱分析来测定。其次,细胞裂解物未经离心产生高杂质,光谱中可以看见在实际含血红素部分附近有一个近紫外峰。细菌细胞对FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸的摄取可能需要监测或至少改变,以通过将酶转移到所需的小部分来改善血红素的掺入。监测也可以通过光谱法进行,使用例如铁锌作为比色测定的螯合剂。总体而言,本次质量评估的所有步骤都是通过手持设备完成的,这使得例如在生产环境中的质量控制直接可行,而无需将任何方法转移到另一个分析系统。 浙江专注fluidlabR-300便携式细胞计数仪品牌排行手持式分光光度计R-300。
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光谱仪的能力如何?
我们的光谱仪在 0 - 2.5 的值范围内呈线性,光度精度为 0.01 或 1 %。可以在 375 nm 和 700 nm 之间捕获光谱,光谱分辨率小于 2 nm。更多信息可以在光谱仪的性能报告中找到。
细胞计数仪的功能如何?
我们的细胞计数仪与手动方法(Neubauer 室)和已建立的自动细胞计数仪均显示出高度相关性(准确度为 99%,确定系数 R²=0.9956)。
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重现性测量的可重复性是评估设备(特别是样品通道)的机械公差的影响、光谱测量随时间的稳定性和测量值记录的准确性的一个重要因素。在这方面,美国药典规定每种情况下至少6次测量,不高于0.005的标准偏差或消光值的0.5%。使用全部的参考玻璃滤光片这些值可以很容易地实现。表2显示了n=10的重复测量值表2:参考玻璃滤光片的重复性测量。所有测量系列的标准偏差均低于规定的极限值0.005,因此符合美国药典(n=10)。 上海怡赛有细胞计数仪。
fluidlabR-300细菌生长和蛋白质含量的测定
材料和方法
用pLEMO质粒转化Lemo21大肠杆菌细胞,该质粒含有用于阴性选择的氯霉素抗性盒以及由上游LacOperon控制的目的蛋白的基因。我们选择了细胞色素P450酶作为模型酶,因为这些酶对芳香化合物的羟基化具有有趣的催化作用。为了获得充分的表达,将FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸添加到LB生长培养基中,以确保血红素基团的正确结合,从而形成全息复合物。
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fluidlab R-300细胞计数的准确性和精确性
图三::为了确定fluidlab R-300细胞计数的准确性和精确度,每个样本在血细胞计中人工计数三次以确定标准值,然后使用自动细胞计数器计数10次。我们对3种不同细胞系的3个不同浓度均用fluidlab R-300和竞品进行了测定。对于给定浓度的所有测量结果取平均值(N=10),并计算标准偏差以评估随机性,图中短线表示标准偏差。
细胞计数器的准确度(也称为真实度)描述了测量值与“标准”或已知值的接近程度,而精确度(或称精密度)指的是重复测量值彼此之间的接近程度。对于细胞计数,使用血细胞计显微镜下人工计数通常被认为是标准的参考方法。然而,人工计数也容易出错、耗时,并且高度依赖于用户的专业水平。
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