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将序列粘贴到序列框中，同理更改名字以及添加酶切位点序列（下游酶切位点是BamHI）和保护碱基的序列，然后点击“addprimertotemplate”-生命科学软件点击“Map”，Ctrl键选择两个引物（如图），点击“Action”→“PCR”点击“PCR”，即获得扩增产物-生命科学软件打开表达载体序列，按Ctrl键选择两个酶切位点（蓝色标记的），点击“Action”→“Restrictioncloning”→“Insertfragment”点击“Insert”，选择刚刚扩增产物的文件“A”，然后分别输入相应内切酶的名字，点击插入的片段。在右下角点击“Clone”即可。生命科学软件有什么特点。福建数据可视化处理生命科学软件

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得到的结果如下图所示。下图中显示的酶是能够切断目的基因的酶，因此要排除。所以我们剩下的可以选择的酶包括Nde1,EcoR1,Pst1共3种酶。下一步打开载体DNA文件。-生命科学软件打开载体以pGADT7AD为例，查看切入位点的酶有哪些。在筛选的过程中还要注意酶切位点不能把基因切断。因此在选择酶切位点时候要保证两点。1.载体中多克隆位点中包含该限制性内切酶。2.目标基因可酶切的位置不包含该限制性内切酶。点击图中标记的地方MCS（多克隆位点）插入基因的位置。-生命科学软件。常用生物学软件介绍。

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