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生命科学软件基本参数
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Gibson组装-生命科学软件。通过融合多达八个片段或通过将多达八个片段插入向量来模拟GibsonAssembly。GibsonAssembly是一种流行的无缝克隆方法。选择要融合的片段及其方向,SnapGene将设计引物。线性化的载体可以通过酶消化或反向PCR产生。IN-FUSION®克隆-生命科学软件。通过将八个片段插入载体来模拟Clontech的In-Fusion克隆。融合克隆是创建无缝基因融合的一种非常通用的方法。选择要融合的片段及其方向,SnapGene将设计引物。线性化的载体可以通过酶消化或反方向PCR产生。

得到的结果如下图所示。下图中显示的酶是能够切断目的基因的酶,因此要排除。所以我们剩下的可以选择的酶包括Nde1,EcoR1,Pst1共3种酶。下一步打开载体DNA文件。-生命科学软件打开载体以pGADT7AD为例,查看切入位点的酶有哪些。在筛选的过程中还要注意酶切位点不能把基因切断。因此在选择酶切位点时候要保证两点。1.载体中多克隆位点中包含该限制性内切酶。2.目标基因可酶切的位置不包含该限制性内切酶。点击图中标记的地方MCS(多克隆位点)插入基因的位置。-生命科学软件。生命科学软件有哪些应用。

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点击序列可以查看区域内的可用酶切位点。我们可以看到所有酶切位点中,在我们实验室有的酶又不会把基因切碎的酶*有Nde1,EcoR1,而Pst1不在载体的酶切位点上,所以排除。这里我们选择双酶切法,所以选择了Nde1,EcoR1两个位点,其中Nde1在前,EcoR1在后-生命科学软件查看可以插入的酶切位点后,返回到目的基因的DNA文件。点击primerforward序列,点击Insertions,***列绿色方框不要管,这个方框是用来添加氨基酸,在构建载体过程不需要调整。把第二列红色方框改成***个酶切位点基因Nde1,然后点击insert.并在前面添加G或者C为保护碱基(也可以网络查询适用的保护碱基)。-生命科学软件。医学生物行业常用专业软件介绍。成都定制化生命科学软件价格

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