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得到的结果如下图所示。下图中显示的酶是能够切断目的基因的酶，因此要排除。所以我们剩下的可以选择的酶包括Nde1,EcoR1,Pst1共3种酶。下一步打开载体DNA文件。-生命科学软件打开载体以pGADT7AD为例，查看切入位点的酶有哪些。在筛选的过程中还要注意酶切位点不能把基因切断。因此在选择酶切位点时候要保证两点。1.载体中多克隆位点中包含该限制性内切酶。2.目标基因可酶切的位置不包含该限制性内切酶。点击图中标记的地方MCS（多克隆位点）插入基因的位置。-生命科学软件。

将序列粘贴到序列框中，同理更改名字以及添加酶切位点序列（下游酶切位点是BamHI）和保护碱基的序列，然后点击“addprimertotemplate”-生命科学软件点击“Map”，Ctrl键选择两个引物（如图），点击“Action”→“PCR”点击“PCR”，即获得扩增产物-生命科学软件打开表达载体序列，按Ctrl键选择两个酶切位点（蓝色标记的），点击“Action”→“Restrictioncloning”→“Insertfragment”点击“Insert”，选择刚刚扩增产物的文件“A”，然后分别输入相应内切酶的名字，点击插入的片段。在右下角点击“Clone”即可。生命科学软件有什么用。

TA和GC克隆-生命科学软件。通过TA或GC克隆捕获PCR产物选择常规TA克隆或高校GC克隆为了方便起见，通过了常见的TA克隆载体和Lucigen的GC克隆载体。退火寡核苷酸将两个寡核苷酸退火以形成双链产物使用简单的控件添加突出端以进行限制性克隆。避免错误-生命科学软件。使用SnapGene确保所需的结构是正确的，并确认已获得所需的序列。基因融合阅读框确保构造中的翻特征在框架中。链接的翻译使用“序列”视图可以一目了然的查看两个已翻译的要素是否在框架中。如果这样，翻译将链接在同一行上。如果不是，则翻译在单独的行上。生命科学软件 - 为科研计算提速。上海FCS Express生命科学软件价格

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