HCD利用人胎儿胰腺组织中的靶向Zhong Liu发生开发了永生化人β细胞系,其中使用慢病毒载体整合了两个转基因,SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)两种转基因均在β细胞特异性大鼠胰岛素启动子(RIP)的控制下表达。***代细胞,名为EndoC-βH1,以组成型方式表达SV40LT和hTERT,而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中,这些转基因可在loxP介导的CRE重组后被切除,位点位于慢病毒骨架的3'LTR。EndoC-βH5细胞是通过使用表达可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒载体对人胎儿胰腺进行靶向Zhong Liu发生而获得的。糖尿病细胞模型—EndoC-BH5 细胞响应葡萄糖以动态方式分泌胰岛素,并且 GIP 和 GLP-1 类似物进一步增强分泌。浙江糖尿病细胞模型无菌环境操作

人原代β细胞的可用性有限,从人胰岛制剂中纯化β细胞具有挑战性。在啮齿类动物中,β细胞系自 20 世纪 70 年代初以来就已经可用,并且在研究β细胞功能方面非常有用。然而,啮齿动物的β细胞并不是研究人类β细胞的理想选择,因为人类和啮齿动物的β细胞在许多方面彼此不同。例如,在啮齿类动物中,胰岛素由 2 个基因编码,而在人类中,只有 1 个基因编码。啮齿动物和人类β细胞的功能差异是由于葡萄糖转运和磷酸化在葡萄糖感知中的相对作用不同。功能胰腺B细胞糖尿病细胞模型糖尿病细胞模型人B细胞系,用慢病毒载体整合了SV40大T抗原 (SV40-LT) 和人端粒酶逆转录酶(hTERT) 两种转基因。

糖尿病患者的数量不断增长,凸显了对生理相关且易于获得的人类胰腺β细胞模型的需求,这些模型可以加速对疾病机制的理解和新药的开发,在糖尿病研究方面具有巨大潜力。EndoC-βH5细胞是EndoC-bH人类胰腺β细胞家族中较新一代的细胞,EndoC-βH5细胞聚集并形成球体,这些球体是大小和形状均质。EndoC-βH5细胞可直接作为冷冻验证的功能性人类β细胞使用,因此可以随时使用。EndoC-βH5细胞在迄今为止测试的所有功能测定中均表现良好,且表现出强大的标准化和批次间的再现性,可以进行可靠的数据解释。细胞以剂量依赖性方式响应葡萄糖而分泌胰岛素,并且肠jiang xue tang素进一步增强葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
HumanCellDesign构建了EndoC-BH1、EndoC-BH3、EndoC-βH5、GLTxEndoC-βH5、HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰岛B细胞模型。通过多轮次优化改良,获得的功能胰腺B细胞,无限接近天然人源胰岛B细胞,其胰岛素分泌功能与天然细胞类似,基于PDX1/NKX6.1关键基因验证的细胞均一性达到90%以上,在2.8mM和11mM葡萄糖剂量下表现出10倍的胰岛素分泌反应,对GLP-1R激动剂、Exendin-4刺激产生明显增强,且可实现批量化生成,实现稳定供应。此外,HumanCellDesign开发系列人源胰岛B细胞模型EndoC-BH5的同时,开发了配套的细胞培养试剂,可用于细胞培养和后续相关实验。糖尿病细胞模型即用型 EndoC-BH5 细胞的生产和免疫标记表征.

表达HLA-A2的EndoC-βH5-HLA-A2系是通过每105细胞使用100ngp24衣壳蛋白与pTRIPDU3CMVHLA-A2IRESPURO慢病毒转导EndoC-βH5来产生的。在1mg/ml嘌呤霉素存在下将细胞扩增三周以选择转导的细胞。为了完全成熟,将EndoC-βH5和EndoC-βH5-HLA-A2细胞再培养3周,并用5mM他莫昔芬和0.5mM更昔洛韦处理,以切除永生化基因并选择切除的细胞。使用胰蛋白酶(25300e054)收集所得细胞,表达EndoC-βH5细胞的修饰HLA-A2引发同种异体反应性T淋巴细胞ji huo,概括了1型糖尿病中涉及的一些自身免疫机制。糖尿病细胞模型可用于糖尿病炎症研究。浙江糖尿病炎症糖尿病细胞模型
糖尿病细胞模型EndoC-BH5 细胞在迄今为止测试的所有功能测定中均表现良好。浙江糖尿病细胞模型无菌环境操作
EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等细胞可在体外在葡萄糖剂量刺激下产生正常的胰岛素分泌反应,对GLP-1R/GLP-1等胰岛素刺激因子产生正常响应,可以响应细胞因子刺激,表达HLA-A2等T细胞受体,因此可用于糖尿病炎症相关等多种药物开发实验。EndoC-BH5细胞可批量稳定生产,因此可以进行基于siRNA的高通量筛选研究中,用于鉴定出潜在的2型糖尿病药物靶点。另外,Humancelldesign根据法国生物伦理立法收集人类胎儿组织,获得法国生物医学局(巴黎)的批准,批准号为PFS08-005。浙江糖尿病细胞模型无菌环境操作
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