四川外泌体超滤离心管

选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。超滤离心管通常具有标准化设计，使其易于与其他实验室设备集成使用。四川外泌体超滤离心管

离心管就是一个简单的可以承受高转速压力的管子，比如离一些样品，分离出上清沉淀。 蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，目前较常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用，使用一次就扔掉太浪费。以下是个人总结的使用方法和注意事项。离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分，内管中是带有一定分子量的膜，当高速离心时，分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了，分子量比它大的就截留在上面(即内管中)，就是超滤的原理。超滤离心管的选择主要看你要截留那部分物质，就选择比较小分子量小的，如果你要截留26KD的，你要的超滤管就要比26小。但两者也要有一定的差距，比如，选择20-25KD之间的就不合适，因为26的也可能会出去(这是由制造工艺决定的)。所以选择20KD以下的超滤管比较合适。浙江小型超滤离心管采购超滤离心管是一种用于分离和纯化生物大分子的工具。

避免过度浓缩，体积越小，越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液，必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面，有助于减少膜表面吸附，能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。离心管是一个简单的可以承受高转速压力的管子,比如离一些样品,分离出上清沉淀。超滤离心管会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子（即外管）中了,分子量比它大的就截留在上面（即内管中）,就是超滤的原理.常用于浓缩样品。 超滤离心管通常不需要预处理即可使用，不过对于蛋白质样本处理，特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。

一般来说，超滤的回收率可达90%以上。样本损失大多是由于滤膜表面和容器表面的非特异性吸附引起的。因此，选择口碑好、优良品质的浓缩离心管非常重要。作为过滤方面的老牌公司，提供了多种浓缩离心管，可对50 μl到60 ml的样本进行高效的浓缩和脱盐。它配备了（改良的聚醚砜）膜，确保低的非特异性吸附和高的回收率。当然，这个的前提是你选对了浓缩离心管。浓缩离心管，适合处理不同体积的样本。你可以根据你的样本量来选择。不过，如果样本浓度低体积大，可以选择较小容积的浓缩离心管多次重复加样离心。一旦样本体积确定，下一步就是选择适当的MWCO。对于蛋白质而言，建议所选滤膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3。通常，截留孔径越小，流速越慢，但截留比例更大。离心机转速会影响到超滤效果，因此需要根据实验要求调整相应的转速。

超滤离心管的常见问题与解答，一：超滤离心管的膜材质是什么？超滤离心管的膜材质为特有的Ultracel再生纤维素膜，生产工艺严格，截留分子量明确而，蛋白吸附损失较小。二：如果要用超滤离心管的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少？按照经验，建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级（10倍）。不保证超滤离心管不包含RNA酶，建议用0.1%DEPC在37度浸泡2小时，以完全灭活RNA酶；残留的DEPC可以用Milli-Q超纯水洗涤除去。去污剂因其独特的性质，当浓度大于临界微团浓度（Critical Micelle Concentration、CMC）时，去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象，这有可能会影响去污剂的去除效果，具体的操作步骤请垂询我们。超滤离心管可根据不同孔径大小选择超滤膜，以便过滤出所需大小范围内的目标分子。北京3K超滤离心管咨询

超滤离心管是一个快速、便捷的方法来从混合物中分离和提取大分子，如蛋白质、核酸等。四川外泌体超滤离心管

当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。四川外泌体超滤离心管

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