台州100K超滤离心管使用方法

超滤管采用其特有的再生纤维素膜，定义为：一个确定NMWL 的超滤膜应该截留至少90% 以上的这个大小的球形分子，即100kDa的球形蛋白用100k的再生纤维素膜得率超过90%。请仔细查看以下默克生命科学官方数据：(以0.5mL的AU0.5为例，其它型号截留分子量的选择原则一致，具体离心力和离心时间不同。截留分子量选小啦！看到这个表，你是否发现原来抱怨超滤管流速偏慢的根源来自对于截留分子量定义的误解。膜孔径要小于目的分子这是一原则。如果分子有近似球形的立体结构(而非明显的线性分子)，在再生纤维素超滤膜体系内，选择“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超滤管是较佳选择，这样操作起来又快又好，既保证了样品回收率，又缩短了离心时间，大幅降低大分子损伤风险。超滤离心管可以有效地去除溶液中的杂质，使样品更纯净。台州100K超滤离心管使用方法

超滤离心管使用方法和注意事项：1、选择合适的超滤离心管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤离心管需要插在冰上预冷。3、质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法*时间处理，后果不可预测！上海离心管厂家直销超滤离心管还可用于制备DNA文库或RNA文库，以进行基因克隆和功能研究。

超滤作为一种膜分离技术，普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换，其原理是样本在力的作用下，通过超滤膜孔径的筛滤，大分子量的颗粒被截留下来，而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜，从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的，这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效，可同时浓缩和纯化分子，一般来说超滤的回收率能够达到90％以上，因此得到许多人的青睐。一种超滤离心管，包括主管，主管为顶部开口底部封闭结构，主管开口处安装有顶盖，主管内安装有内管，内管上下贯通，内管底面贴合有超滤膜，超滤膜将内管底面包覆，超滤膜底面贴合有支撑板，超滤膜位于内管底面与支撑板之间，内管底部安装有底托，内管配合底托将超滤膜、支撑板压紧，内管、超滤膜、支撑板、底托与主管中位于底托以下的容腔空间连通。

以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用设备头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml。离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。超滤离心管还可用于检测药品样品中的残留物和污染物，并进行质量监测和控制。

我们通常会以1/3到1/6甚至更低的区间来选择超滤管的孔径，通常更小的孔径会使回收率提高但是超滤的时间也会比较长。一定范围内，超滤的回收率和速度是一对矛盾体，因此可以通过优化孔径的选择，在回收率可以接受的条件下选择较大的孔径，来提高超滤的速度。低温如< 10 ℃，液体的粘度会增加，流动性会降低，因此液体的跨膜速率也会降低。适当提高超滤温度，往往能够提高超滤的速度。有些客户需要做几十ml到几百ml样品的浓缩或者缓冲液置换，但是却使用1支或几支15ml的超滤管反复离心来完成操作，这样必然造成时间上的浪费。怎么办？一定要挑选适合处理量的产品，减少不必要的反复离心从而提升超滤的效率。超滤离心管还可用于制备高纯度的酶、蛋白质等生物制品，以应用于不同领域的实验室操作。上海离心管厂家直销

使用超滤离心管时应注意保持其平衡和稳定，并调整旋转参数以确保较佳效果。台州100K超滤离心管使用方法

当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。台州100K超滤离心管使用方法

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