富集培养基是一种特殊的培养基,它的设计旨在促进某类特定微生物的生长和繁殖,同时抑制或阻止其他微生物的生长。这种培养基常用于从环境样品中分离和富集目标微生物,如细菌、或古菌等。以下是富集培养基的一些关键特点和应用:1.**特定营养添加**:富集培养基通常包含有利于目标微生物生长的特定营养物质,如有机和无机营养物、酸碱度调节剂、抗生物质等。2.**选择性抑制**:通过添加某些化学物质,如染色剂、结构类似物和食盐等,抑制非目标微生物的生长。3.**环境条件控制**:根据目标微生物对pH、温度、氧气需求等条件的特殊要求,调节培养条件以促进其生长。4.**促进复苏**:某些情况下,富集培养基可以用来促进处于休眠状态的微生物复苏,从而提高分离效率。5.**应用广**:富集培养基在微生物学研究、医学诊断、环境保护、食品检测等领域有广泛应用。6.**操作过程**:包括样本采集、稀释、选择适当的富集培养基和培养条件、以及后续的分离和鉴定。7.**连续富集培养**:有时需要通过连续转移培养来逐步提高目标微生物的比例,尤其是在处理难以培养的微生物时。GAM肉汤用于厌氧菌的培养,是一般培养基的基础。它营养丰富,使用时无需加血,适用于各类厌氧菌的增菌 。改良高氏合成一号琼脂预装培养皿
嗜盐菌选择性琼脂是一种专门用于分离和培养嗜盐菌的培养基,其特点和应用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化钠:40.0g/L-结晶紫:0.0005g/L-琼脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生长。-高含量的氯化钠创造高渗环境,有利于嗜盐菌的生长,同时抑制不耐高盐的细菌。-结晶紫抑制革兰氏阳性菌的生长。-琼脂作为凝固剂,使培养基凝固成固体。-高pH值有助于抑制部分杂菌的生长。3.**配制方法**:-称取77.0g培养基粉末,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中。-分装后,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**使用方法**:-将培养基倾注成平板,待凝固后使用。-接种样品后,放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。5.**细菌生长特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:无色菌落,较湿润。-溶藻弧菌ATCC17749:无色菌落。-金黄色葡萄球菌ATCC25923:抑制生长。6.**微生物灵敏度试验**:-按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于36±1℃需氧培养18-24小时。-回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。改良高氏合成一号琼脂预装培养皿血液增菌培养基含有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化钠、葡萄糖、枸橼酸钠、对氨基苯甲酸、硫酸镁、酚红等成分。
TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。GAM肉汤培养基广泛应用于菌种的生长、保存和实验操作。它支持多种微生物的生长,并在菌种冷冻保存中。
PALCAM琼脂基础(PalcamAgarBase)是一种用于分离单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的特点如下:1.**成分**:PALCAM琼脂基础包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化钠、葡萄糖、甘露醇、柠檬酸铁铵、七叶苷、氯化锂、酚红和琼脂等成分。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为李斯特氏菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:氯化锂和抗生物质添加剂(如盐酸吖啶黄素、硫酸多粘菌素B和头孢他啶)能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌,从而提高对李斯特氏菌的选择性。4.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养。5.**配制方法**:通常称取71.9g培养基粉末,加入1升蒸馏水,加热至完全溶解,分装后进行高压灭菌。使用时,冷却至50℃,加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌培养皿。6.**结果观察**:李斯特氏菌在PALCAM琼脂上生长时,会水解七叶苷生成黑色的6,7-二羟基香豆素,形成灰绿色菌落,中心凹陷,周围有黑色环。
TSFA含有胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、琼脂和脱脂奶粉等成分,为嗜冷菌提供碳源、氮源、维生素和生长因子。改良高氏合成一号琼脂预装培养皿
胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础(Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase)是一种用于微生物培养的培养基,具有以下特点和用途:1.**成分**:该培养基的主要成分包括胰酪胨、植物胨、氯化钠、磷酸氢二钾和葡萄糖。胰酪胨和植物胨提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为碳源;磷酸氢二钾作为缓冲剂;氯化钠帮助维持渗透压。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于蜡样芽孢杆菌的选择性增菌培养,也可用于MPN值测定和消毒剂消毒效果的测试。4.**添加剂**:在使用时,需要添加多粘菌素B以抑制杂菌的生长,促进目标微生物蜡样芽孢杆菌的生长。多粘菌素B的添加量根据产品说明进行,例如每100ml培养基基础添加1支多粘菌素B(1mg)或每225ml培养基添加1支多粘菌素B(2.25万单位)。5.**制备方法**:通常需要称取一定量的培养基粉末,加热溶解于蒸馏水中,煮沸后进行高压灭菌。灭菌后冷却至50℃左右,加入多粘菌素B,混匀后无菌分装于灭菌试管中备用。6.**质量控制**:接种蜡样芽孢杆菌后,在30℃下培养48小时,应观察到良好的生长和溶液混浊,以验证培养基的有效性。