牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。明胶的凝固点在28℃左右,受运输过程的温度及震荡影响,出现培养基在管壁凝固形成不规则状,此为正常现象。TSAC预装培养皿
营养琼脂方瓶(罗氏瓶)通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式,适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基,用于非苛养微生物的培养,以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-琼脂:15.0g/L-终pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取33g营养琼脂培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶(罗氏瓶)中,通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**:-灭菌完成后,取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集,可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下,将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后,可将培养皿放置在热空气烤箱中,用较低温度烘烤几分钟,以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**:-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间,容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。精氨酸葡萄糖斜面琼脂预装培养皿不同细菌在TSFA上的生长特征不同,如金黄色葡萄球菌可产生黄色的色素,大肠埃希氏菌形成无色透明大菌落。
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。
克罗诺杆菌筛选肉汤(CronobacterScreeningBroth,简称CSB培养基)是一种用于检测环境和食品中克罗诺杆菌的选择性培养基。克罗诺杆菌是一种重要的食源性的病原体,能够引起新生儿和婴儿的严重疾病,如坏死性小肠结肠炎、败血症和脑膜炎。以下是克罗诺杆菌筛选肉汤的一些特点和配制方法:1.**配方**:-蛋白胨:10.0g-牛肉浸粉:3.0g-氯化钠:5.0g-溴甲酚紫:0.004g-蔗糖:10.0g-万古霉素:0.01g-pH:7.4+/-0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取28gCSB培养基粉末,用1000ml去离子水重悬。-在121°C下灭菌15分钟。-冷却至大约50°C时,加入万古霉素(每100ml培养基中加入1mg万古霉素)。-混匀后分装到无菌容器中。3.**工作原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源。-氯化钠维持渗透压平衡。-蔗糖作为克罗诺杆菌可发酵的糖类。-溴甲酚紫作为pH指示剂,其变色范围为pH5.2(黄色)至pH6.8(紫色)。-发酵蔗糖产酸,使得培养基的pH下降,溴甲酚紫由紫色变为黄色。4.**用途**:-CSB培养基用于检测环境和食品中的克罗诺杆菌。PYG培养基的干粉应在避光、干燥处保存,未开封的保质期通常为三年。使用后应立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块 。
TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
BHI培养基可用于从临床标本中进行需氧细菌的初步分离,也可用于培养单增李斯特菌、葡萄球菌等。TSAC预装培养皿
轻唾琼脂培养基(MSA)基础,也称为轻型唾液链球菌琼脂培养基基础,是一种用于分离培养轻型链球菌(绿色链球菌)、唾液链球菌(非溶血性链球菌)和肠球菌的选择性培养基。以下是它的一些特点:1.**成分**:该培养基的配方中含有胰酪蛋白胨、牛肉粉、磷酸氢二钾、葡萄糖、蔗糖、台盼蓝、结晶紫和琼脂等。其中,胰酪蛋白胨和牛肉粉提供氮源和碳源,蔗糖作为可发酵的碳水化合物来源,磷酸氢二钾作为缓冲剂,台盼蓝和结晶紫作为染料提供菌落颜色,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:通过添加结晶紫和亚碲酸钾,该培养基可以抑制大多数革兰氏阴性杆菌和大多数革兰氏阳性细菌的生长,而对链球菌和肠球菌的生长影响较小。4.**应用**:轻唾琼脂培养基基础主要用于轻型链球菌、唾液链球菌和肠球菌的分离培养,这些细菌在培养基上可以形成具有特征颜色的菌落,有助于后续的鉴定和分析。5.**配制方法**:通常称取90g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。灭菌结束后,冷却至50-55℃,加入无菌1%亚碲酸钾溶液,混匀后倒入无菌培养皿中。TSAC预装培养皿