VRBA培养皿

TYC培养基（TryptoneYeastCystineMedium）是一种用于分离口腔中链球菌（Streptococcusspp）的选择性培养基。除了用于分离血链球菌外，TYC培养基也可以用于制备变形链球菌（Streptococcusmutans）的分离培养基。这种培养基的配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亚硫酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、无水乙酸钠和蔗糖等成分，琼脂作为凝固剂，pH值调整至7.3±0.2（25℃）。TYC培养基通过其成分提供了细菌生长所需的氮源、碳源、维生素和生长因子。其中，L-胱氨酸和亚硫酸钠有助于抑制某些非目标细菌的生长，而促进目标链球菌的生长。此外，TYC培养基也可以添加杆菌肽（0.2U/ml）以增加其选择性。在实验室中，TYC培养基通常按照以下方法配制：1.称取98.0g培养基粉末，加入1000mL蒸馏水或去离子水中。2.加热煮沸至完全溶解。3.分装后，在121℃高压下灭菌15分钟。4.灭菌结束后摇匀，以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。5.如有需要，培养基冷却至50～55℃时，可选择性添加过滤除菌的杆菌肽0.2U/ml以增加选择性。TYC培养基在微生物学研究和临床诊断中具有重要应用，特别是在口腔微生物的检测和研究中。克氏双糖铁试验时间通常控制在18-24小时，以确保细菌发酵充分且不过度，避免影响判断结果。VRBA培养皿

TCBS琼脂（ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar）是一种用于分离培养弧菌科细菌，特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点：1.**成分**：-酵母浸粉：5.0g/L-蛋白胨：10.0g/L-硫代硫酸钠：10.0g/L-枸橼酸钠：10.0g/L-牛胆粉：5.0g/L-牛胆酸钠：3.0g/L-蔗糖：20.0g/L-氯化钠：10.0g/L-柠檬酸铁：1.0g/L-溴麝香草酚兰：0.04g/L-麝香草酚兰：0.04g/L-琼脂：15.0g/L-pH值：8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**：-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境，高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应，检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂，细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**：-称取8.9g培养基，溶解于100ml蒸馏水中，煮沸后冷却至50℃，倾入无菌平皿，备用。-注意：无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**：-副溶血性弧菌：蓝绿色斗笠状菌落，H2S阴性。-溶藻弧菌：黄色菌落，H2S阴性。-霍乱弧菌：黄色菌落，H2S阴性。

CATC琼脂是一种用于分离和培养肠球菌的选择性培养基，特别适用于食品和饮料中肠球菌的分离培养。以下是它的一些特点：1.**成分**：含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、磷酸二氢钾、柠檬酸钠、吐温80、碳酸钠、叠氮钠和红四氮唑(TTC)等成分，琼脂作为凝固剂。2.**pH值**：培养基的pH值控制在7.0±0.2（25℃），适合肠球菌的生长。3.**选择性**：叠氮钠可以抑制革兰氏阴性菌的生长，而红四氮唑(TTC)可以作为指示剂，粪肠球菌能将TTC还原成一种酸性的偶氮染料，显示为深红色菌落。4.**应用**：主要用于食品和饮料中肠球菌的分离培养，也可用于生活饮用水中肠球菌的计数。5.**配制方法**：通常称取58.5g的培养基粉末，加热煮沸溶解于1000mL蒸馏水中，冷却至50-55℃时倾入无菌平皿备用，无需高压灭菌。6.**质量控制**：质控菌株如粪肠球菌(ATCC29212)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)等在CATC琼脂上的生长情况可以用于评估培养基的性能。7.**储存条件**：CATC琼脂通常在避光、干燥处保存，保质期可达三年。8.**用途**：除了用于食品和饮料中肠球菌的分离外，还适用于水质检测中的肠球菌计数。

使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下：1.**准备工作**：-确保实验室无菌操作条件，穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**：-按照培养基包装上的说明，称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中，通常为100mL。-将混合物加热至沸腾，以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**：-将溶解好的培养基冷却至50℃左右（避免过热，以免杀死细菌），此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中，一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固，形成固体培养基平板。4.**接种样品**：-使用无菌操作，将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**：-将接种后的平板倒置，放入恒温培养箱中。-根据实验要求，通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**：-培养结束后，观察平板上的生长情况，记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落，如蓝绿色或黄色菌落，这些可能是目标弧菌。

PALCAM琼脂基础（PalcamAgarBase）是一种用于分离单核细胞增生李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）的选择性培养基。它的特点如下：1.**成分**：PALCAM琼脂基础包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化钠、葡萄糖、甘露醇、柠檬酸铁铵、七叶苷、氯化锂、酚红和琼脂等成分。2.**pH值**：培养基的pH值控制在7.2±0.2（25℃），为李斯特氏菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**：氯化锂和抗生物质添加剂（如盐酸吖啶黄素、硫酸多粘菌素B和头孢他啶）能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌，从而提高对李斯特氏菌的选择性。4.**应用**：主要用于食品、水和污水样本中单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养。5.**配制方法**：通常称取71.9g培养基粉末，加入1升蒸馏水，加热至完全溶解，分装后进行高压灭菌。使用时，冷却至50℃，加入配套的添加剂，混匀后倾入无菌培养皿。6.**结果观察**：李斯特氏菌在PALCAM琼脂上生长时，会水解七叶苷生成黑色的6,7-二羟基香豆素，形成灰绿色菌落，中心凹陷，周围有黑色环。

下层培养基成分则包括血消化汤、琼脂、葡萄糖和酚红溶液。这些成分为细菌提供碳源、氮源。VRBA培养皿

乙基紫叠氮钠肉汤（EthylVioletAzideBroth，EVA）是一种用于微生物培养的选择性培养基，特别适合于链球菌的增菌培养。以下是它的一些特点和用法：**特点**：1.**成分**：含有酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、叠氮钠和乙基紫等成分。2.**pH值**：pH值控制在7.0±0.2（25℃），为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**：叠氮钠可以抑制革兰氏阴性细菌的生长，特别是对变形杆菌的抑制效果好。4.**应用**：主要用于链球菌的增菌培养，也可用于其他需氧菌和兼性厌氧菌的培养。**配制方法**：1.称取35.8g培养基粉末，加入1000mL蒸馏水。2.加热搅拌至完全溶解。3.分装后，在121℃高压下灭菌15分钟。**质量控制**：-制备好的培养基应进行pH值、无菌性检查和适用性检查。-培养基的保存应避光、密封，并在已验证的条件下贮藏。**应用**：-用于链球菌的分离培养，通过观察菌落的生长情况和特征进行鉴定。**注意事项**：-在配制和操作过程中，应避免摄入、吸入、皮肤接触，并在通风橱中进行，佩戴适当的个人防护装备。VRBA培养皿