牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。VRBA(Violet Red Bile Agar)是一种培养基,通常用于选择性分离和鉴定肠道细菌。Campy-Cefex琼脂预装培养皿
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
GC肉汤培养基(GCBrothMedium),也称为胰蛋白胨大豆肉汤培养基,是一种加富培养基,通常用于培养营养需求较高的微生物,特别是那些难以培养的细菌。以下是GC肉汤培养基的一些特点和配制方法:1.**配方组成**:-ProteosePeptone(胰蛋白胨):15.0g-CornStarch(玉米淀粉):1.0g-DipotassiumPhosphate(磷酸氢二钾):4.0g-MonopotassiumPhosphate(磷酸二氢钾):1.0g-SodiumChloride(氯化钠):5.0g-DIWater(蒸馏水):500ml-将pH值调节至7.2+/-0.22.**配制方法**:-将上述成分溶解在蒸馏水中,加热使培养基完全溶解。-将溶液在121°C下高压灭菌15分钟。-冷却至50°C,然后加入无菌的2%血红蛋白溶液和其他添加剂。-混合均匀后,分配到培养容器中。3.**用途**:-作为致病菌的富集培养基。-用于配制血液培养基和血琼脂培养基。-用于无菌试验,检测好氧菌污染。-在医学上,常用来培养从临床样品中分离的致病微生物。-用于药敏试验和纸片扩散法试验。4.**保存条件**:-密封,2-25°C保存。5.**注意事项**:-避免摄入、吸入、皮肤接触。GC肉汤培养基因其营养丰富,适用于多种微生物的生长,包括好氧菌、厌氧菌。它在微生物学研究和医学诊断中有着广泛的应用。
锰盐营养琼脂(ManganeseNutrientAgar)是一种用于微生物培养的培养基,特别适用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验。以下是它的一些主要特点和用途:1.**成分**:通常包含硫酸锰、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠和琼脂。其中,硫酸锰的含量为0.0308g/L,蛋白胨为10.0g/L,牛肉粉为3.0g/L,氯化钠为5.0g/L,琼脂为15.0g/L。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验,也可用于芽孢杆菌或梭菌的培养和孢子的形成。4.**检验原理**:蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂作为培养基的凝固剂;硫酸锰可促进芽孢的生成。5.**使用方法**:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。需要注意的是,由于培养基中含有少量硫酸锰,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**:通过接种质控菌株,如短小芽孢杆菌CMCC(B)63202、枯草芽孢杆菌黑色变种ATCC9372等,放置于55℃需氧培养48小时,以验证培养基的性能。使用VRBA培养皿时,通常将待测样品涂布在培养皿表面,然后进行培养,观察并鉴定产生的菌落。
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。NAC琼脂培养皿具有较高的选择性,能够有效地抑制不同种类的微生物,有助于分离目标微生物。Mueller-Hinton琼脂培养皿
VRBA中的溴青紫红是一种指示剂,具有抑菌和变色作用。Campy-Cefex琼脂预装培养皿
营养琼脂方瓶(罗氏瓶)通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式,适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基,用于非苛养微生物的培养,以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-琼脂:15.0g/L-终pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取33g营养琼脂培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶(罗氏瓶)中,通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**:-灭菌完成后,取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集,可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下,将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后,可将培养皿放置在热空气烤箱中,用较低温度烘烤几分钟,以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**:-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间,容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。Campy-Cefex琼脂预装培养皿