单细胞功能组学

LabEx可提供的服务及优势（二） LabEx服务的优势： 1、专业的抗体公司； 2、先进的实验仪器平台； 3、可靠、放心的结果； 4、实惠、亲民的价格； 5、认真、严谨的工作态度。 Luminex平台服务：应用微球和流式细胞仪的原理， 微球内部含有三种荧光免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分 500 种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此利用微球技术，可以同时检测高达 500 个蛋白或基因。 MSD（Meso Scale Discovery）：将 Western Blot 从 16 小时缩短至 4.5 小时。针对 550 位北美和欧洲的生物医药研究人员的报告中显示,基于电化学发光技术的MSD（Meso Scale Discovery）是较受欢迎的 5 大免疫分析品牌之一。 CBA (Cytometric Beads Array)：即细胞因子微球检测技术。是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。为啥高分的文章用的都在做细胞因子的检测？单细胞功能组学

问：因子检测技术有哪些？ 答: Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。 问：多因子实验适用的样本类型有哪些？ 答: Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/ Tissue lysate（细胞/组织裂解液）、Cerebrospinal Fluid（脑脊液）、支气管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。 问：如何计算96孔板可做多少样本？ 答: 标曲16孔，预实验8孔，剩余72孔，单孔可做72样本，复孔可做36样本； 问：多因子实验的正式实验，是否可以分批次检测？ 答: 可以，但是有如下要注意： （1）CBA：试剂盒须在一个月内用完，否则标准曲线要重做，重做就要用到试剂，那样本就样减少。 （2）Luminex：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂也要在一个月内用完，防止试剂过期。 （3）MSD：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂在一个月内用完，防止试剂过期，每次送样+标准曲线的数量，建议是4的倍数，否则会造成浪费。 单细胞功能组学多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。

酶联免疫斑点技术（Elispot）特点： 酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linked Immunospot Assay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA)，能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。 实验设计在96孔培养板上进行，直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质，包被上特异性的单克隆抗体，用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程，对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体，该抗体需要无毒，亲和力高等特点。)之后，在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟，培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。

LabEx始终致力于为您的研究需要，提供前沿的多因子技术平台，用心服务，现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCR Array、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台，助推科研进步！ 多因子检测技术 包括Luminex、MSD、CBA、Antibody Array，一份样本可检测几十种不同的生物分子，可实现高通量、高灵敏度等特点 免疫组化 可通过HE、IF、Tunel、DAB、Nissl、Masson染色等，对指标进行定位分析，并且可提供病理分析平台。 流式细胞术 通过不同荧光对同一细胞进行对参数分析，可提供细胞的12色染色。检测速度快，分析样本量大，包含的样本种类多。流式细胞术(flow cytometry，FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。

LUMINEX常见问题及解答（二） 6) 客户自己提供抗体，是否可以进行LUMINEX检测？ Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是，需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。 7) 除了蛋白，LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测？ 可以用于基因表达，基因多态性和HLA配型分析。 8) 如何判定 LUMINEX数据表达水平差异有无意义？ 表达差异主要取决于标本的性质和数量，我们公司为客户提供专业的数据统计服务。 9) LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较? Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术， 检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大，是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子，而且检测速度较慢，不适合高通量分析。 由此可见，两种方法应用方向有很大差别。 LabEx提供抗体芯片技术(Antibody Array)服务！单细胞功能组学

MSD平台由于其独特的电化学发光原理，可将许多非特异信号予以排除，受样本性质的影响更小。单细胞功能组学

酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。 基本原理：它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。 测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。
其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪） 加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。
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