使用MPM对神经元进行成像时,通过随机访问扫描—即激光束在整个视场上的任意选定点上进行快速扫描—可以只扫描感兴趣的神经元,这样不仅避免扫描到任何未标记的神经纤维,还可以优化激光束的扫描时间。随机访问扫描可以通过声光偏转器(AOD)来实现,其原理是将具有一个射频信号的压电传感器粘在合适的晶体上,所产生的声波引起周期性的折射率光栅,激光束通过光栅时发生衍射。通过射频电信号调控声波的强度和频率从而可以改变衍射光的强度和方向,这样使用1个AOD就可以实现一维横向的任意点扫描,利用1对AOD,结合其他轴向扫描技术可实现3D的随机访问扫描。但是该技术对样本的运动很敏感,易出现运动伪影。目前,快速光栅扫描即在FOV中进行逐行扫描,由于利用算法可以轻松解决运动伪影而被普遍的使用。多光子显微镜在基础科学和临床诊断领域的应用范围正在持续增长。荧光多光子显微镜Ultima 2P Plus

当激光光束焦点的位置在镜面上,此时被反射的激光在无限空间中成为准直光束,并在OBJ2的焦平面上形成了一个激光光斑。同理,如果横向扫描光束,则会形成远离倾斜镜镜面的焦点,这又导致返回的光束会聚或发散,进而OBJ2能在轴向不同位置形成焦点,通过这种方式即能实现连续的轴向扫描。对于较小的倾斜角,聚焦没有球差。该组在实验中表征了这种将横向扫描转换为轴向扫描技术的光学性能,并使用它将光片显微镜的成像速度提升了一个数量级,从而可以在三个维度上量化快速的囊泡动力学。该组还演示了使用双光子光栅扫描显微镜以12kHz进行共振远程聚焦,该技术可对大脑组织和斑马鱼心脏动力学进行快速成像,并具有衍射极限的分辨率。荧光多光子显微镜Ultima 2P Plus多光子显微镜涉及医学、生物学、化学、物理学、电子学、工程学等学科,生产工艺相对复杂,进入门槛较高。

Ca2+是重要的第二信使,对于调节细胞的生理反应具有重要的作用,开发和利用双光子荧光显微成像技术对Ca2+荧光信号进行观测,可以从某些方面对有机体或细胞的变化机制进行分析,具有重要的意义。利用双光子荧光显微成像技术可以观察细胞内用荧光探针标记的Ca2*的时间和空间的荧光图像的变化,还可以观察细胞某一层面或局部的(Ca2+)荧光图像和变化。通过对单细胞的研究发现,Ca2+不仅在细胞局部区域间的分布是不均匀的,而且细胞内各局部区域的不同深度或层次间也存在不同程度的Ca2+梯差即所谓的空间Ca2梯差。
多光子激发扫描显微成像系统的不足。只能对荧光成像。如果样品包括能够吸收激发光的色团,如色素,样品可能受到热损伤。分辨率略有降低,虽然可以通过同时利用共焦的小孔得到改善,但是信号会有损耗。受昂贵的超快激光器限制,多光子扫描显微镜的成本较高。多光子激发显微镜应用举例。动物和脑片神经细胞结构与功能、动物脑皮层的成像、胚胎发育过程的长时间动态观测、多光子激发光解笼、细胞内微区钙动力学、多光子激发自发荧光、其它应用。4tune光谱检测器,实现多光子显微镜的光谱型检测。

当细胞受到外界刺激时,随着刺激时间的增加,即使继续刺激,Ca2+荧光信号也不会继续增强,反而会减弱,直至恢复到无刺激时的水平。对于细胞受精过程中Ca2+荧光信号的变化,发现粘附过程中Ca2+荧光信号没有变化,但当配子融合时,Ca2+荧光信号强度出现一个不稳定的峰值,持续数分钟。这些现象对于研究受精发育的早期信号以及Ca2+在卵子和受精卵发育中的作用具有重要意义。在其他生理过程中,如细胞分裂和胞吐,Ca2+荧光信号的强度也会发生很大的变化。全球多光子显微镜主要厂商基本情况介绍,包括公司简介、多光子显微镜产品型号、产量、产值及动态等。飞秒激光多光子显微镜三维分辨率
实现细胞层面观察,多光子显微镜技术助力医学突破。荧光多光子显微镜Ultima 2P Plus
神经科学重要的研究工具-多光子显微镜作为神经科学重要的研究工具,近年来发展快速,品牌也众多。我们通常都是在一间开着冷气的房间里的超大防震台上见过这样一套设备。台面上复杂的光路也让我们在使用中小心翼翼,生怕弄坏了哪里而无从修复。你是否想象过一台放在书桌边上就能使用的多光子显微镜,一台跟普通显微镜一样操作简便的多光子显微镜,一台不用担心会碰坏的多光子显微镜,一台可以在不同实验室之间搬来搬去的多光子显微镜,一台可以从任意角度进行观察扫描的多光子显微镜?滔博生物TOP-Bright是一家集研发,生产,销售于一体的专注于神经科学产品及致力于向高校、科研机构等领域提供实验室一体化方案的高科技企业。业务服务范围已遍布至全国各地几百家实验室。目前公司主营产品是享誉全球的国际品牌和产品,这些仪器设备都是科学研究所必备且不可替代的基础仪器荧光多光子显微镜Ultima 2P Plus