LNP 制备中，如何通过优化操作减少核酸的降解损耗？

迈安纳（上海）仪器科技有限公司2026-06-06

在LNP制备中减少核酸降解损耗，关键是全程温和操作，重点优化以下环节： 1. 混合环节：采用微流控设备，通过调节总流速（TFR）控制剪切力，mRNA等长链核酸对剪切敏感，过快流速易导致断裂。 2. 试剂与耗材：使用DEPC处理水配制缓冲液、无RNase认证的耗材；所有溶液现配现用或分装冻存，避免反复冻融。 3. 缓冲液优化：加入RNase抑制剂（如0.1-1 U/µL）；mRNA-LNP制备时，水相使用pH 4.0酸性缓冲液（抑制RNase活性）。 4. 纯化环节：去除乙醇（降低细胞毒性）和去除未包封的mRNA：透析或者超滤离心；同时将溶液换成中性环境（如PBS）或储存缓冲液（如含蔗糖的Tris缓冲液），冻干时添加海藻糖/蔗糖作为保护剂。