包封率始终上不去，只调整 N/P 比为什么不够？

迈安纳（上海）仪器科技有限公司2026-06-08

只调整N/P比往往不够，因为包封率受多个因素协同影响，N/P比只是其中之一。以下是几个关键原因： 1. 混合效率不足：即使N/P比合适，如果脂质和mRNA混合不均匀（如手工操作或混合器效率低），局部乙醇浓度过高会导致mRNA未被包裹而沉淀或降解。 2. 水相pH值不当：可电离脂质需要在酸性环境（pH 4.0左右）才能质子化带正电，有效结合带负电的mRNA。如果pH偏高（如5.0以上），脂质质子化不足，结合力下降，包封率自然上不去。 3. 流速比未优化：FRR（水相:有机相）决定了混合过程中的乙醇稀释速率。FRR过低（如1:1）或过高（如5:1）都可能破坏LNP的稳定形成。经典推荐是FRR=3:1。 4. 脂质浓度或配比问题：可电离脂质与辅助脂质（如DSPC、胆固醇、PEG-脂质）的摩尔比失衡，会影响LNP的结构稳定性和包封能力。 5. 混合时间/流速不合适：混合时间过短（TFR过高）可能导致mRNA来不及被包裹；混合时间过长（TFR过低）则可能使mRNA暴露在有机溶剂中受损。