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外泌体(Exosomes)是一种直径在40-100 nm的圆形单层膜结构,是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分,如微小RNA ( microRNA,miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、mRNA和环状RNA(circular RNA,circRNA)。环状RNA(circular RNA)是近来新发现的一种非编码RNA分子,研究趋势火爆。环状RNA表达具有组织和疾病特异性,与组织发育、疾病发生 和发展密切相关。此外环状RNA不易降解,可做为新型疾病分子标志物。外泌体环状RNA的研究势必会为疾病诊断与医治带来极大帮助。RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中,-80℃保存,避免反复冻融。贵州外泌体价格

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流式细胞仪不仅可以检测囊泡的大小、数量,而且通过荧光标记可以检测囊泡的来源,将囊泡进行分类,因此,流式细胞仪是进行囊泡快速、高通量、多参数检测的较优de选择。但是,传统流式细胞仪无法测量<300nm的外泌体,因此很难进行精确地定量和定性分析。纳米颗粒跟zong分析技术(NanosightTrackingAnalysis,NTA)是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法,它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号,拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像,对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析,从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。新疆技术外泌体研究外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。

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外泌体的生物学功能:1、first报道的外泌体生物功能是红血球成熟过程中排出来的蛋白质。2、进一步的研究表明其功能包括排泄不必要的蛋白质和RNA等物质。3、可促进生物体免疫应答反应。4、对凝血和血管生成其促进作用。5、可通过化学信号参与ai细胞的转移。6、在哺乳期的免疫调节过程中起到重要的作用。7、不仅参与触发下游信号传导,而且特异性靶向受体细胞和交换蛋白。8、可提供特殊的核酸且起到运输功能。9、作为细胞-细胞之间传递信息的重要分子。10、在病毒和朊蛋白等多种病原体之间起着独特的作用。

如今外泌体分析用于临床诊断和医治监控显然是一个重要领域。特定的跨膜蛋白信号可以识别tumour特异性的外泌体,而外泌体内蛋白的改变可以用于推断tumour细胞对医治措施的反应。虽然外泌体有如此大的临床价值,但是临床日常外泌体分析却十分困难,这是因为目前缺少足够灵敏且快速的试验平台,尤其是进行外泌体蛋白质分析。 目前人们利用电镜来分析外泌体的大小和形态,利用流式细胞仪来分析细胞表面标记,通过Western blot和ELISA等方法对蛋白进行分析,或通过qPCR和新一代测序NGS来分析RNA。常规的转录组测序采用Oligo d(T)法纯化带Poly(A)尾巴的RNA分子。

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上皮-间质转化(EMT)被报道参与tumour细胞和tumour相关巨噬细胞(TAM)之间的相互作用,且EMT的结直肠ai(CRC)细胞促进TAM的M2极化,但具体的机制如何还不清楚。武汉大学中南医院熊斌和Wang Shuyi合作在Molecular Therapy发表文章,EMT-CRC产生高表达miR-106b的外泌体,直接传递给巨噬细胞,导致巨噬细胞miR-106b升高,激huoPI3Kγ/AKT/mTOR信号,促进M2的极化,从而促进tumour进展。揭示了CRC进展的新机制,为预防CRC转移提供了潜在的靶点。环状RNA不易降解,可做为新型疾病分子标志物。四川上海云序外泌体价格

密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂。贵州外泌体价格

外泌体普遍存在于生物体的免疫应答反应中,外泌体可以通过介导促炎症反应来促进免疫反应,tumour细胞分泌的外泌体还可以抑制免疫反应。tumour细胞分泌的外泌体可以促进ai症的侵袭和转移,加快ai症部位的血管生成,有助于tumour微环境中的上皮间充质转化,并且增强tumour的耐药性。外泌体通过与受体细胞特异性结合的方式,传递各种生物学信息,发挥重要的生物学作用。本文分别就外泌体的产生机制、分离与鉴定、其对机体免疫过程和疾病的发生和发展的作用等方面的研究进展进行综述。贵州外泌体价格

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